[发明专利]一种利用程序性细胞死亡直观检测小麦籽粒发育早期内部细胞形态动态变化的方法在审
| 申请号： | 202110300779.9 | 申请日： | 2021-03-22 |
| 公开（公告）号： | CN113049333A | 公开（公告）日： | 2021-06-29 |
| 发明（设计）人： | 李永波;楚秀生;崔德周;樊庆琦;隋新霞;黄琛 | 申请（专利权）人： | 山东省农业科学院作物研究所 |
| 主分类号： | G01N1/28 | 分类号： | G01N1/28;G01N1/30;G01N21/84 |
| 代理公司： | 济南舜源专利事务所有限公司 37205 | 代理人： | 赵斌;苗峻 |
| 地址： | 250100 山东省济南*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 程序性 细胞 死亡 直观 检测 小麦 籽粒 发育 早期 内部 形态 动态 变化 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种利用程序性细胞死亡直观检测小麦籽粒发育早期内部细胞形态动态变化的方法，其特征在于：具体步骤如下：
(1)取开花后3天、5天、7天和9天的小麦种子的籽粒进行石蜡包埋；
(2)对石蜡包埋的籽粒在中部进行横切；
(3)将石蜡切片依次放入二甲苯中20min，无水乙醇中5min，75％酒精中5min，最后用自来水洗3次，每次30s；
(4)将自来水洗过的石蜡切片放入高碘酸染液中染色10min，用自来水冲洗1次，再用蒸馏水洗1次；
(5)放于雪弗染液中避光染色20min，用流水冲洗5min；
(6)放于苏木素染液中染色3-5min，用自来水冲洗；
(7)放于1％盐酸酒精分化液中分化30s，然后用自来水冲洗；
(8)放于返蓝液中返蓝，用流水冲洗5min；
(9)放入无水乙醇中5min，二甲苯中5min，最后用中性树胶封片；
(10)利用显微镜对切片进行镜检，采集相关图像，并对细胞结构进行分析。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)中的小麦选自济麦22。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(7)中所述的酒精分化液由1毫升浓盐酸加入99毫升70％酒精中制备而成。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(8)中所述的返蓝液由0.5毫升氢氧化氨加入蒸馏水99.5毫升配制而成。
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