[发明专利]一种检测酪氨酸酶活性的方法在审
申请号: | 202110300784.X | 申请日: | 2021-03-22 |
公开(公告)号: | CN113295658A | 公开(公告)日: | 2021-08-24 |
发明(设计)人: | 李高;蔡永其 | 申请(专利权)人: | 闽江学院 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 福州旭辰知识产权代理事务所(普通合伙) 35233 | 代理人: | 程春宝 |
地址: | 350100 福建省*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 酪氨酸 活性 方法 | ||
1.一种检测酪氨酸酶活性的方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)CB[8]-ThT-YLA/Dopa-LA溶液的制备:将多肽YLA或Dopa-LA与硫黄素T、葫芦[8]脲在缓冲液中均匀混合后恒温孵育;
(2)酪氨酸酶活性的检测:在CB[8]-ThT-YLA/Dopa-LA溶液中加入不同浓度的酪氨酸酶溶液,持续进行荧光信号强度测定,每隔1 min测一次;根据荧光信号随时间变化的曲线,计算出酶催化反应的速率,利用反应速率与酶浓度成正比,推算出酪氨酸酶活性。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:恒温孵育的温度为室温~45℃。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的CB[8]-ThT-YLA/Dopa-LA溶液中包含与CB[8]结合的荧光分子及其组合。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的CB[8]-ThT-YLA/Dopa-LA溶液中包含与CB[8]结合,同时含有酪氨酸或者多巴的多肽或小分子等物质。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的缓冲液包括磷酸盐缓冲液。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:在激发波长为350 nm-440 nm、发射波长为460 nm -680 nm下进行荧光信号强度测定。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于:在激发波长为417 nm、发射波长为570 nm下进行荧光信号强度测定。
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