[发明专利]一种牛ITGβ5基因插入/缺失突变的检测方法及其应用有效
| 申请号： | 202110304073.X | 申请日： | 2021-03-22 |
| 公开（公告）号： | CN112941203B | 公开（公告）日： | 2023-05-26 |
| 发明（设计）人： | 蓝贤勇;赵佳宁;李洁;宋恩亮;姜富贵;潘传英;费攀锋;王勇胜;赵海谕;陈宏;陈璟州;李雪峰 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人： | 范巍 |
| 地址： | 712100 陕*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 种牛 itg 基因 插入 缺失 突变 检测 方法 及其 应用 | ||
1. 牛
2.一种牛
以待测牛基因组DNA为模板，利用PCR扩增包含
所述牛
所述繁殖性状选自卵巢宽、黄体直径中的一种或两种，插入/插入基因型II的个体黄体直径更优，插入/缺失ID基因基因型的个体卵巢宽更优；
所述牛为中国荷斯坦牛。
3. 根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述PCR的扩增引物对为：
上游引物：5’-GTTCCTGCTCAAGTCTCGGG-3’
下游引物：5’-CTTCCACTCTCACCCCCAAC-3’。
4. 根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述PCR采用的反应程序为：95 ℃预变性5 min；94 ℃变性30 s， 68 ℃退火30 s，72 ℃延伸20 s，18个循环，每循环后退火温度减1℃；94 ℃变性30 s，50 ℃退火30 s，72 ℃延伸20 s，25个循环；72 ℃延伸10 min；所述电泳采用质量浓度为2.5%的琼脂糖凝胶。
5. 根据权利要求2所述的应用，其特征在于：根据电泳结果，所述插入/缺失多态性位点有三个基因型，其中插入/插入基因型II表现为187 bp一条带纹，插入/缺失基因型ID表现为187 bp和174 bp两条带纹，缺失/缺失基因型DD表现为174 bp一条带纹。
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