[发明专利]一种检测汉城型汉坦病毒的试剂盒及其检测方法

权利要求书

1.一种用于汉城型汉坦病毒检测的引物，其特征在于，包括：第1组引物SEO-S Assay和第2组引物SEO-M Assay，

第1组引物SEO-S Assay，包括：

SEO-S-3F：AGGCAACCATAAACATAAC

SEO-S-3R：TCGGAAGAAATCATCATTC

SEO-S-3P：ATCAATCATACCTCAGACGCACAC

第2组引物SEO-M Assay，包括：

SEO-M-2F：CCTGCAATGTATTCTGTG

SEO-M-2R：CAGACACATTGGAGAAGTA

SEO-M-2P：CTTATCAGGACCAGGTGCTTCAT。

2.一种用于汉城型汉坦病毒检测的试剂盒，其特征在于，包含权利要求1所述的引物。

3.权利要求2所述的试剂盒在检测汉城型汉坦病毒中的应用，所述应用不以疾病诊断为目的。

4.一种非疾病的诊断目的的汉城型汉坦病毒的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)提取待测样本RNA，使用商品化提取试剂盒，提取人或动物的组织、细胞或血样中的RNA，-80℃储存备用；

(2)以待测样本RNA和cDNA为模板均可，检测所用特异性引物和荧光探针序列如下：

(3)检测体系配制完成后，加入Sapphire Chip中，每孔25μL，将芯片放入CrystalDigital PCR System中进行PCR扩增，

(4)PCR反应完成后，将芯片取出，放置于NaicaTM prism微滴阅读分析系统扫描芯片、分析数据。

5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，

以待测样本RNA和cDNA为模板均可，检测所用特异性引物和荧光探针序列如下：

不同模板反应体系组成及配制方法如下：

(a)以待测样本RNA为模板反应体系如下：

试剂名称	加入体积(μL)1×
TM XLT One-Step RT-qPCR ToughMix]]>	12.5
1μM的Fluorescein sodium salt	2.5
25×的SEO-S Assay FAM	2
25×的SEO-M Assay HEX	1
25×的β-actin Assay CY5	1
2O和RAN模板]]>	6
总体积	25μL

(b)以待测样本cDNA为模板反应体系如下：

6.根据权利要求4或5任意一项权利要求所述的检测方法，其特征在于，(c)检测体系配制完成后，加入Sapphire Chip中，每孔25μL，将芯片放入Crystal Digital PCR System中进行PCR扩增，反应条件如下：