[发明专利]一种基于序列设计的无细胞体系线形模板降解抑制方法有效
| 申请号： | 202110307923.1 | 申请日： | 2021-03-23 |
| 公开（公告）号： | CN112899272B | 公开（公告）日： | 2022-07-19 |
| 发明（设计）人： | 卢元;陈鑫杰 | 申请（专利权）人： | 清华大学 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N15/70 |
| 代理公司： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人： | 陈波 |
| 地址： | 10008*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 序列 设计 细胞 体系 线形 模板 降解 抑制 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种基于序列设计的、通过大肠杆菌无细胞基因表达体系线形基因模板降解抑制从而提高以线形DNA为模板的无细胞基因表达体系的蛋白质表达量的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：利用PCR技术，通过引物在线形DNA两端加上规律富含鸟嘌呤、胞嘧啶碱基对的保护序列；将获得的修饰后的线形DNA加入无细胞基因表达体系进行无细胞蛋白表达反应；其中所述规律富含鸟嘌呤、胞嘧啶碱基对的保护序列为SEQ ID NO.1；所述无细胞基因表达体系中添加有DNA酶抑制剂GamS；其中所述无细胞蛋白表达反应中为15-37℃；其中所述无细胞蛋白表达反应时间为0.1-24h。
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