[发明专利]一种抗小象甲甘薯品种的鉴定方法

说明书

本发明公开了一种抗小象甲甘薯品种的鉴定方法。在甘薯营养生长期的叶片上接待测甘薯小象甲，让甘薯小象甲取食，然后将甘薯小象甲剥离叶片，统计虫食面积，根据虫咬面积大小判断甘薯小象甲是否为抗小象甲甘薯品种。本发明利用ImageJ或其他电子图形统计软件计算灰度的方法统计虫洞透光的面积，这种方法避免了主观将小象甲为害程度分级的抗性评价方式，从而客观而直接地反应甘薯小象甲的取食行为。虫咬面积大，则植株不抗虫，虫咬面积小或不咬则表现为抗虫。量化的植株叶片虫咬面积不用进行分级，可直接作为表型数据结合遗传图谱等进行甘薯小象甲抗性QTLs定位和GWAS分析，从而促进常规育种和分子标记辅助选择甘薯小象甲抗性品种的进程。

技术领域：

本发明属于农业害虫防治技术领域，具体涉及一种抗小象甲甘薯品种的鉴定方法。

背景技术：

甘薯[Ipomoea batatas(L.)Lam.]属于旋花科番薯属，是重要的粮食作物。甘薯具有粮食、蔬菜、药材、饲料和能源作物等多种用途。甘薯在世界范围内广泛栽培，其中亚洲和非洲的热带和亚热带地区是甘薯的主要种植地区，而中国和一些非洲国家是世界上主要的甘薯种植国。中国是世界上甘薯种植面积最大的国家，占全球甘薯产量的70％，而广东省是我国甘薯的重要生产区域，其种植面积约为15万公顷。得益于广东温暖的气候，广东省甘薯生产占领了全国冬春薯市场，具有可观的经济效益。然而广东高温高湿的气候环境，也导致了甘薯病虫害频繁发生，严重威胁着甘薯的种植。

甘薯小象甲(Cylas formicarius)属于鞘翅目蚁象虫科，是危害甘薯生产最严重的虫害。甘薯小象甲在热带和亚热带气候温暖的地区(广东、福建、海南、台湾等)一年可发生多代。甘薯小象甲成虫不仅危害甘薯地上部分(茎和叶)，导致植物逐渐萎蔫死亡，并且在结薯期将卵产在薯块中，幼虫在薯块中蛀食，造成薯块无法储藏和食用。一般情况下，甘薯小象甲为害甘薯生产造成10％至30％的损失，严重时可导致绝收。

甘薯小象甲是备受全球关注的甘薯虫害，但长期以来抗虫品种的缺乏制约着甘薯的种植和生产。目前甘薯小象甲的防治措施主要采用非疫区检疫，农业防治、化学防治和生物防治相结合的综合防治办法，但仍以化学防治为主。据调查，在广东省湛江的甘薯种植区，农民大量施用甲拌磷等高毒农药，不仅加重了生产成本，同时存在严重的生态环境和食品安全等方面的问题。更重要的是，近年来由于种苗调运和商品薯带虫的原因，导致甘薯小象甲向长江中下游地区扩散，威胁长江中下游地区甘薯种植。因此，建立客观可量化的抗性评价方法对鉴定甘薯小象甲抗性品种具有重要意义，同时结合分子标记辅助育种的方法，解析其抗性机制，对甘薯抗小象甲品种的培育具有重要意义。此外也有利于经济适用、环境友好型甘薯种植产业的发展。

目前，抗甘薯小象甲品种评价方法多以薯块抗性评价为主，但却忽略了甘薯小象甲首先取食为害营养生长时期甘薯植株的茎和叶片，造成植株失水萎蔫枯死，无法结薯的重要事实。同时，现有的甘薯小象甲抗性评价方法多为主观定义的危害指数，人为将危害程度分级，无法利用直接客观可量化的统计方法确定为害程度，从而造成甘薯小象甲抗性表型数据不稳定，影响抗性分子标记的定位。

发明内容：

本发明的目的是提供一种抗小象甲甘薯品种的鉴定方法，为甘薯小象甲抗性品种的筛选提供一个新的思路和鉴定方法。同时客观可靠的表型鉴定方法更有利于甘薯抗小象甲分子标记的获得，从而加快分子标记辅助选择甘薯小象甲抗性品种的育种进程。

本发明的抗小象甲甘薯品种的鉴定方法，包括以下步骤：

在甘薯营养生长期的叶片上接待测甘薯小象甲，让甘薯小象甲取食，然后将甘薯小象甲剥离叶片，统计虫食面积，根据虫咬面积大小判断甘薯小象甲是否为抗小象甲甘薯品种。

一般虫咬面积大，则植株不抗虫，虫咬面积小或不咬则表现为抗虫。

优选，所述的统计虫食面积是将咬食后的叶片放在X光片观片机上拍照，利用ImageJ软件或其他电子图形统计虫食面积。

所述的甘薯营养生长期的叶片可以是离体叶片或非离体叶片。