[发明专利]一种鉴定罂粟及其3种近缘种的特异性遗传标记组合物有效
申请号: | 202110310626.2 | 申请日: | 2021-03-23 |
公开(公告)号: | CN113005216B | 公开(公告)日: | 2023-04-11 |
发明(设计)人: | 王白石;高珊;张颖;张瑾;徐小玉 | 申请(专利权)人: | 公安部物证鉴定中心 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 张羽 |
地址: | 100038 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鉴定 罂粟 及其 近缘 特异性 遗传 标记 组合 | ||
1.一种检测或辅助检测待测样本是否为罂粟或是否含有罂粟的方法,其特征在于:所述方法包括如下步骤:
(a2)采用用于鉴定罂粟的引物对组合物中的8种引物对共同对所述待测样本的基因组DNA进行PCR扩增,得到扩增产物,所述用于鉴定罂粟的引物对组合物由引物对P136、引物对P90、引物对BP13、引物对BP12、引物对P107、引物对P85、引物对BP14和引物对P15这8种引物对组成;
所述引物对P136由序列表中序列1所示的单链DNA分子和序列表中序列2所示的单链DNA分子组成;
所述引物对P90由序列表中序列3所示的单链DNA分子和序列表中序列4所示的单链DNA分子组成;
所述引物对BP13由序列表中序列5所示的单链DNA分子和序列表中序列6所示的单链DNA分子组成;
所述引物对BP12由序列表中序列7所示的单链DNA分子和序列表中序列8所示的单链DNA分子组成;
所述引物对P107由序列表中序列9所示的单链DNA分子和序列表中序列10所示的单链DNA分子组成;
所述引物对P85由序列表中序列11所示的单链DNA分子和序列表中序列12所示的单链DNA分子组成;
所述引物对BP14由序列表中序列13所示的单链DNA分子和序列表中序列14所示的单链DNA分子组成;
所述引物对P15由序列表中序列15所示的单链DNA分子和序列表中序列16所示的单链DNA分子组成;
所述引物对P136、所述引物对P90、所述引物对BP13、所述引物对BP12、所述引物对P107、所述引物对P85、所述引物对BP14和所述引物对P15的摩尔比为3:0.5:0.5:6:0.5:0.5:2:2,
所述引物对P136、所述引物对P90、所述引物对BP13、所述引物对BP12中的引物被荧光染料A标记;所述引物对P107、所述引物对P85、所述引物对BP14被荧光染料B标记;所述引物对P15被荧光染料C标记,所述荧光染料A、荧光染料B和荧光染料C为不同颜色的荧光染料;
(b2)检测所述扩增产物,根据检测结果按照如下确定所述待测样本是否为罂粟或是否含有罂粟:若所述扩增产物符合如下1)-8)全部标准,则所述待测样本为或候选为罂粟,或者含有或候选含有罂粟;若所述扩增产物不符合如下1)-8)全部标准,则所述待测样本不为或候选不为罂粟,或者不含有或候选不含有罂粟;
1)含有显所述荧光染料A的荧光颜色且大小为97-99bp的等位基因片段;
2)含有显所述荧光染料A的荧光颜色且大小为129-131bp和/或133-135bp的两个等位基因片段;
3)含有显所述荧光染料A的荧光颜色且大小为182-184bp的等位基因片段;
4)含有显所述荧光染料A的荧光颜色且大小为241-243bp的等位基因片段;
5)含有显所述荧光染料B的荧光颜色且大小为111-113bp或115-117bp的等位基因片段;
6)含有显所述荧光染料B的荧光颜色且大小为147-149bp的等位基因片段;
7)含有显所述荧光染料B的荧光颜色且大小210-212bp和222-224bp的两个等位基因片段;
8)含有显所述荧光染料C的荧光颜色且大小为151-153bp或154-156bp的等位基因片段。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:每种引物对中的两条引物之间的摩尔比为1:1。
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