[发明专利]一种茶叶中赤霉素含量的检测方法

说明书

本发明公开了一种茶叶中赤霉素含量的检测方法，采用超高压液相色谱‑串联质谱法对茶叶中赤霉素含量进行检测，该方法包括如下步骤：准确称取一定量的茶叶样品，向该茶叶样品中加入提取溶剂，超声提取后离心；取上清液，加入净化剂进行净化，再经高速离心后，取上清液于水浴中经吹干后，再进行定容，制得供试品溶液；确定HPLC‑MS‑MS条件；根据HPLC‑MS‑MS检测分析的检测结果绘制标准曲线；将供试品溶液进行HPLC‑MS‑MS检测分析，并将检测结果与标准曲线进行对照，得到供试品溶液中的赤霉素浓度。该方法基质干扰小，灵敏度高，且线性关系、回收率良好，精密度和准确度也高，可以为开展赤霉素的安全性研究提供参考。

技术领域

本发明涉及一种含量检测方法，特别涉及一种茶叶中赤霉素含量的检测方法。

背景技术

生长调节剂是一类能对植物生长起调节作用的活性物质。赤霉素是较常见的一种植物生长调节剂，在植物生长和发育中发挥着重要的调节作用。茶树是一种以收获幼嫩叶芽为主的多年生经济作物，茶树春梢萌动越早，春茶生产时段越长，产生的经济效益就越大。赤霉素可以打破嫩芽冬眠，促进新梢萌发及嫩芽生长，提高茶叶产量。目前茶园中广泛使用赤霉素，但存在选择盲目性及滥用赤霉素等问题。尽管赤霉素毒性不大，但长期、大量、不合理使用也会在人体器官中蓄积，造成慢性中毒。因此，茶叶质量安全问题备受关注。欧盟规定赤霉素的最高残留限量值(MRL)为5mg/kg。我国目前尚未制定茶叶中赤霉素的最大残留限量。

目前国内外检测赤霉素的方法有毛细管气相色谱法、高效液相色谱法、气质联用法、酶联免疫法、高效液相色谱-串联质谱法等。有些方法其前处理过程较为繁琐，有些方法则灵敏度低，存在操作复杂、环境不友好等缺点。且茶叶中赤霉素检测方法也未见相关文献报道。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明的目的在于提供一种茶叶中赤霉素含量的检测方法，该方法利用超高压液相色谱－串联质谱法检测分析茶叶中赤霉素的含量，操作简单、快速、可靠、准确，基质干扰小，灵敏度高，且线性关系、回收率良好，精密度和准确度也高，具有较高的实际应用价值，可以为开展赤霉素的安全性研究提供参考。

为实现上述技术目的，达到上述技术效果，本发明通过以下技术方案实现：

一种茶叶中赤霉素含量的检测方法，采用超高压液相色谱-串联质谱法对茶叶中赤霉素含量进行检测，该检测方法包括如下步骤：

(1)制样及提取

准确称取一定量的经粉碎后的茶叶样品，向该茶叶样品中加入提取溶剂，超声提取后离心；

(2)供试品溶液制备

取离心后的上清液，加入净化剂进行净化，再经高速离心后，取上清液于水浴中经氮气吹干后，再进行定容，制得供试品溶液；

(3)确定HPLC-MS-MS条件

HPLC色谱条件：

流动相：流动相A为乙酸铵溶液，流动相B为乙腈；

梯度洗脱条件：

0min时，流动相A为95％，流动相B为5％；2min时，流动相A为95％，流动相B为5％；2.1min时，流动相A为90％，流动相B为10％；8.0min时，流动相A为20％，流动相B为80％；10.0min时，流动相A为20％，流动相B为80％；10.1min时，流动相A为95％，流动相B为5％；12min时，流动相A为95％，流动相B为5％；流速：0.20mL/min；进样量：10μL；柱温40℃；

质谱条件：电喷雾ESI离子源，离子源温度:550℃；采用负离子采集模式，多反应监测方法测定；离子喷雾电压4.5kV；雾化气、气帘气、碰撞气均为高纯氮气；

(3)绘制标准曲线