[发明专利]一种丁酸梭菌培养基

说明书

本发明公开了一种丁酸梭菌培养基，组分包括淀粉、糖、蛋白胨、牛肉粉、硫酸镁、硫酸锰、碳酸钙、乙酸钠、谷氨酸钠、水和小苏打；所述组分重量百分比为：淀粉0.5‑1.5％，糖0.8‑1.5％，蛋白胨0.6‑1.0％，牛肉粉0.5‑1.5％，硫酸镁0.05‑0.1％，硫酸锰0.02‑0.1％；碳酸钙0.5‑2％，乙酸钠0.01‑0.05％，谷氨酸钠0.01‑0.05％，0.5‑1.5％的小苏打，其余为水；本发明，能够降低生产成本，提高发酵活力，解决芽孢形成率低等问题。

技术领域

本发明涉及丁酸梭菌工业化液体发酵形成芽孢的工艺技术领域，具体为一种丁酸梭菌培养基。

背景技术

丁酸梭菌(Clostridium butyricum)又名酪酸菌，丁酸梭状芽孢杆菌，丁酸菌，属于芽孢杆菌科，梭菌属，革兰氏阳性，有芽孢，孢子卵圆，偏心或次端生，1933年由日本千叶医科大学宫入近治博士首先发现并报告的，因此又名宫入菌。丁酸梭菌是一种专性厌氧的革兰氏阳性芽孢杆菌，其直径为(0.6～1.2)×(3.0～7.0)μm，两端钝圆，中间部分轻度膨胀，细菌呈直杆状或稍有弯曲，单个或成对，短链，偶见有丝状菌体，周身鞭毛，能运动。革兰氏染色初培养的菌为阳性，菌稍长可变为阴性。在琼脂平板上形成白色或奶油色的不规则圆形菌落，稍突，直径为1～3mm。不水解明胶，不消化血清蛋白，能够发酵葡萄糖、蔗糖、果糖、乳糖等碳水化合物产酸，一个显著的特征是产生淀粉酶，水解淀粉但不水解纤维素。水解淀粉和糖类的最终代谢产物为丁酸、醋酸和乳酸，还发现有少量的丙酸、甲酸，硝酸盐还原实验均为阴性。丁酸梭菌DNA的G+C含量的摩尔分数为27％～28％。

1935年，俄罗斯微生物研究所Kingi miyairi博士从人的粪便和土壤中分离出丁酸梭菌，随后发现其厌氧培养的过滤物中含有较少的脂肪酸，具有极强的整肠作用，它可抑制肠道中的致病菌，促进肠道中有益菌如双歧杆菌和乳杆菌的生长。肠道菌群失衡会导致各种疾病的发生，丁酸梭菌能促进有益的双歧杆菌、乳酸菌、拟杆菌的增殖和有效的抑制引起疾病的葡萄球菌、念珠菌、克雷伯菌、弯曲杆菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、痢疾杆菌和伤寒沙门菌以及腐败菌的繁殖，从而减少了胺类、吲哚类和硫化氢等有害物质。

丁酸梭菌做为饲料添加剂在饲料中应用，在动物肠道内可体现五大生物特性:一是促进动物肠道有益菌群(双歧杆菌,乳酸杆菌)的增殖和发育，抑制肠道内有害菌和腐败菌的生长、繁殖，纠正肠道菌群紊乱，减少肠毒素的发生；二是在动物肠道内能产生B族维生素、维生素K、淀粉酶等物质，具有保健作用；三是丁酸梭菌的主要代谢产物丁酸是肠道上皮组织细胞的再生和修复主要营养物质；四是厌氧或者兼性厌氧芽孢杆菌，不受胃酸、胆汁酸等影响；五是对多种饲用抗生素有较强的耐受性,可配伍使用。丁酸梭菌作为新饲料添加剂的使用，对于减少当前饲料中抗生素产品的滥用、减少药物在肉品中的残留、降低动物细菌的耐药性和保障动物健康方面有着重要的意义。

目前对于丁酸梭菌的工业化液体发酵工艺普遍存在发酵活力低，芽孢形成率低，产品质量稳定性差，成本高等问题，市场上流通的产品多数不达标，存放一段时间活力明显下降，因此如何提高发酵活力和芽孢形成率成为丁酸梭菌发酵的关键技术之一。

目前对于丁酸梭菌的发酵工艺研究主要集中在菌种诱变筛选、调整发酵工艺中的压力、温度、是否补充惰性气体等方面。

丁酸梭菌是一种严格厌氧菌，在实际生产过程中为了达到厌氧的环境多数采用在发酵罐中通入惰性气体的办法来制造厌氧环境，但是这种方法操作复杂，实用性较差。

针对上述缺陷，所以我们设计一种丁酸梭菌培养基是很有必要的。

发明内容

本发明的目的在于提供一种丁酸梭菌培养基，能够降低生产成本，提高发酵活力，解决芽孢形成率低等问题；小苏打因遇水持续产生二氧化碳使发酵罐中自动形成厌氧环境，提高了丁酸梭菌的发酵活力和芽孢形成率。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：