[发明专利]一种动物肝外胆道恶性狭窄模型的建立方法

说明书

本发明公开了一种动物肝外胆道恶性狭窄模型的建立方法，包括：获得肿瘤组织团块，将所述肿瘤组织团块裁剪获得条形肿瘤组织；将受体动物的腹腔打开并分离和显露出肝外胆管；将所述条形肿瘤组织和条形固定件分别与所述肝外胆管中的胆总管平行放置并捆绑，后抽出条形固定件、缝合受体动物的腹腔并消毒包扎，条形肿瘤组织生长至所述受体动物的胆管狭窄或闭塞形成梗阻性黄疸，获得动物肝外胆道恶性狭窄模型。本发明将肿瘤组织平行固定于胆管，肿瘤生长侵犯胆管，形成胆管肿瘤；且捆绑肿瘤组织时，使用条形固定件保护，保留胆管通畅，保证后续胆管狭窄为肿瘤侵犯导致。该方法简便易行，成功率高，能完全模拟现实中因胆管肿瘤导致的梗阻性黄疸。

技术领域

本发明涉及动物模型技术领域，特别涉及一种动物肝外胆道恶性狭窄模型的建立方法。

背景技术

肝外胆道恶性狭窄是临床的多发疾病，最常见的病因为胆管细胞癌和胰腺癌，其他包括原发性肝癌、转移瘤、壶腹癌等。肝外胆道恶性狭窄可导致胆道梗阻，进一步导致黄疸、皮肤瘙痒、肝功能受损等一系列症状、体征和并发症。及时解除梗阻以及治疗侵入胆管的肿瘤是提高患者生存期和改善生存质量的关键之一。经皮经肝胆道引流术、胆道支架植入术、胆道肿瘤消融术等介入诊疗是肝外胆道恶性狭窄重要的治疗方法。肝外胆道恶性狭窄的病理生理的研究、新型介入器材、诊疗方法等的研发依赖于合适的动物模型。然而，目前常用的肝外胆道恶性狭窄模型多为小鼠、大鼠等啮齿类小动物模型，难以适用于评估新型介入诊疗方法的评估；而兔等较大动物的模型主要由机械性损伤、夹闭等造成，不符合临床实际发病的病理生理基础。

目前的胆管梗阻的动物模型主要有机械性梗阻性黄疸动物模型和药物诱发的胆管肿瘤动物模型。其中，机械性梗阻性黄疸动物模型绝大多数采用结扎、机械损伤或药物损伤动物胆管导致胆管狭窄闭塞以及梗阻性黄疸。然而由于是外力的急性、机械性损伤导致的胆管狭窄，并非肿瘤侵犯所导致的慢性、胆管腔内的胆管狭窄，与现实中因胆管肿瘤导致的梗阻性黄疸患者的病理基础并不相似，并不能完全模拟现实中因胆管肿瘤导致的梗阻性黄疸。此外，药物诱发的胆管肿瘤动物模型采用的是致癌物诱发或者质粒转染方法诱发胆管肿瘤的动物模型。此类模型存在动物模型成瘤率低、动物成瘤后很难产生伴有梗阻性黄疸的状态等缺点。

因此，如何开发一种能完全模拟现实中因恶性肿瘤导致的梗阻性黄疸、并且简便易行、成功率高的肝外胆道恶性狭窄的模型，成为亟待解决的技术问题。

发明内容

本发明目的是提供一种动物肝外胆道恶性狭窄模型的建立方法，该模型能完全模拟现实中因恶性肿瘤导致的梗阻性黄疸，并且简便易行、成功率高，动物成瘤后能产生伴有梗阻性黄疸的状态。

为了实现上述目的，本发明实施例提供一种动物肝外胆道恶性狭窄模型的建立方法，所述方法包括：

获得肿瘤组织团块，后将所述肿瘤组织团块裁剪获得条形肿瘤组织；

将受体动物的腹腔打开并分离和显露出肝外胆管；

将所述条形肿瘤组织和条形固定件均与所述肝外胆管中的胆总管平行放置并捆绑，后抽出所述条形固定件，缝合所述受体动物的腹腔并消毒包扎，后待所述条形肿瘤组织生长使得所述受体动物的胆管狭窄或闭塞形成梗阻性黄疸，获得动物肝外胆道恶性狭窄模型。

进一步地，所述获得肿瘤组织团块，包括：

获得患有肿瘤的供体动物；所述患有肿瘤的供体动物中的肿瘤包括肿瘤细胞或肿瘤组织皮下接种的、天然发生的、基因修饰改造后自发的和致癌物诱发性的中的一种；

从所述患有肿瘤的供体动物中分离获得肿瘤组织团块。

进一步地，所述从患有肿瘤的供体动物中分离，获得肿瘤组织团块，具体包括：

将肿瘤细胞或肿瘤组织接种于供体动物的腹股沟区皮下以进行增殖生长，后进行分离，获得肿瘤组织团块。