[发明专利]一种牙周膜干细胞冻存液及冻存方法有效
申请号: | 202110317033.9 | 申请日: | 2021-03-25 |
公开(公告)号: | CN112772639B | 公开(公告)日: | 2022-07-29 |
发明(设计)人: | 徐会娟;陈道林;陈龙剑 | 申请(专利权)人: | 浙江格蕾斯生物科技有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 南京中高专利代理有限公司 32333 | 代理人: | 卢丹丹 |
地址: | 314000 浙江省嘉兴市南湖区昌盛南*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 牙周膜 干细胞 冻存液 方法 | ||
1.一种牙周膜干细胞冻存液,其特征在于,由以下重量份的原料组成:DMEM/F12培养基80-90份、β-谷甾醇2.5-5份、肉桂醛0.9-1.5份、硫代二丙酸二月桂酯0.5-1.2份、补骨脂酚0.5-0.8份、表皮细胞生长因子1-5份。
2.根据权利要求1所述牙周膜干细胞冻存液,其特征在于,由以下重量份的原料组成:DMEM/F12培养基85份、β-谷甾醇4份、肉桂醛1.2份、硫代二丙酸二月桂酯1份、补骨脂酚0.7份、表皮细胞生长因子3份。
3.一种牙周膜干细胞的冻存方法,其特征在于,采用权利要求1至2任一项所述冻存液冻存。
4.根据权利要求3所述牙周膜干细胞的冻存方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)制备冻存液;
(2)制备牙周膜干细胞悬液:将收集的牙周膜干细胞加入到步骤(1)制备的冻存液中混合得到细胞悬液,分装在无菌冻存管中;
(3)将步骤(2)的冻存管程序降温至-80℃,保存24h,然后转移至液氮中冷冻保存。
5.根据权利要求3所述牙周膜干细胞的冻存方法,其特征在于,步骤(1)包括以下过程:向DMEM/F12培养基中加入β-谷甾醇、肉桂醛、硫代二丙酸二月桂酯、补骨脂酚、表皮细胞生长因子,混合均匀即得。
6.根据权利要求3所述牙周膜干细胞的冻存方法,其特征在于,步骤(2)中牙周膜干细胞悬液中细胞密度为1-5×106个/mL。
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