[发明专利]一种快速检测鹅星状病毒的免疫荧光方法

权利要求书

1. 一种快速检测鹅星状病毒的免疫荧光方法，其特征在于，利用鸡肝细胞对鹅星状病毒感染的组织样品或者已经分离到的病毒进行培养，培养基为含1μg/mL TPCK-胰蛋白酶的DMEM-F12培养基，用针对鹅星状病毒P2蛋白的6C6单抗作为一抗，FITC标记的羊抗鼠IgG作为二抗进行IFA检测；

或者直接取新鲜的组织进行冰冻切片，用针对鹅星状病毒P2蛋白的6C6单抗作为一抗，FITC标记的羊抗鼠IgG作为二抗进行IFA检测。

2.根据权利要求1所述的间接免疫荧光检测方法，其特征在于，所述一抗是杂交瘤细胞株6C6分泌的抗星状病毒P2蛋白单克隆抗体6C6制备而成。

3. 根据权利要求1所述的间接免疫荧光检测方法，其特征在于，鸡肝细胞培养鹅星状病毒时，鸡肝细胞采用含10%胎牛血清的DMEM-F12培养基进行培养，待细胞长满单层后，用PBS洗涤一遍后，以0.25%的胰酶进行消化、传代至所需的细胞培养板中；将鸡肝细胞种至96孔板内培养，在汇合度为约70%时，取100μl鹅星状病毒上清加入900μl含1μg/mL TPCK-胰蛋白酶的DMEM-F12培养基，混匀后每孔加入200微升进行培养；培养3天后，用固定液将96孔板固定干燥，以6C6单抗作为一抗，FITC标记的羊抗鼠IgG作为二抗进行IFA检测；

或者直接取新鲜的组织进行冰冻切片，取新鲜的发病鹅的肾脏组织修至合适大小，用包埋剂将组织块包裹后用冰冻切片机进行切片，随后使用冷丙酮固定后室温风干30分钟至干燥，再以6C6单抗作为一抗，FITC标记的羊抗鼠IgG作为二抗进行IFA检测。