[发明专利]抑制PHB基因的物质在胶质瘤治疗中的应用

说明书

本发明公开了抑制PHB基因的物质在胶质瘤治疗中的应用。本发明发现，PHB基因的敲除或敲低可显著降低GSC的肿瘤细胞球形成能力、细胞活力，并可显著降低GSC细胞的克隆形成能力，即可以显著抑制细胞的自我更新能力，但对普通的非干性肿瘤细胞的细胞活力无影响。本发明的实验还进一步证明，PHB基因的敲除或敲低可抑制GBM肿瘤生长，延长荷瘤小鼠生存期。本发明具有广泛的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物医学领域中，抑制PHB基因的物质在胶质瘤治疗中的应用。

背景技术

源自神经上皮的肿瘤统称为脑胶质瘤，它是最常见的颅内恶性肿瘤，约占颅脑肿瘤的40％-50％，世界卫生组织(WHO)根据脑胶质瘤恶性程度将其分为Ⅰ到Ⅳ级，由低到高。脑胶质瘤根据病理可分为星形细胞瘤、髓母细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤(GlioblastomaMultiforme，GBM)、室管膜瘤、少突胶质细胞瘤等，其中多形性胶质母细胞瘤(GBM)均是Ⅳ级胶质瘤，是恶性程度最高的一类肿瘤，GBM患者即使经过最积极的治疗，平均生存周期也仅为12-15个月。

脑胶质瘤呈浸润性生长，与正常脑组织无明显界限，GBM作为恶性程度最高的胶质瘤，浸润转移更迅速，更易复发，患者预后极差，临床上标准治疗手段为手术结合放化疗。手术不能完全切除病灶，放化疗短时间内可以抑制肿瘤的生长，但GBM对放化疗抵抗且易复发，因此患者5年存活率仍不足5％。GBM组织中的肿瘤干细胞称为胶质瘤干细胞(Gliomastem-like cell,GSC),它与正常的神经干细胞(Neural stem cell，NSC)表达同样的干细胞标志物，如CD133、Nestin、SOX2、Olig2等，同时也具备自我更新、无限增殖、肿瘤发生的能力。越来越多证据表明GSC与GBM肿瘤发生、持续生长和复发密切相关。以GSC为研究对象，剖析其在脑胶质瘤中的特点及功能，可以更深入的揭示脑胶质瘤的发生、发展以及复发的原因，为脑胶质瘤的治疗提供新的思路。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何治疗和/或预防脑肿瘤。

为解决上述技术问题，本发明提供了如下任一应用：

1、抑制PHB含量和/或活性的物质在制备治疗和/或预防脑肿瘤产品中的应用；

2、抑制PHB基因表达或敲除PHB基因的物质在制备治疗和/或预防脑肿瘤产品中的应用。

上述应用中，所述治疗和/或预防脑肿瘤可体现在抑制脑肿瘤生长和/或延长脑肿瘤动物生存期上。

所述动物可为哺乳动物。所述哺乳动物可为人或小鼠。在本发明的一个实施例中，所述小鼠为免疫缺陷小鼠Balb/c nude。

上述应用中，所述脑肿瘤可为胶质瘤。所述胶质瘤可为由胶质瘤干细胞(GSC)异种移植引发的肿瘤。在本发明的一个实施例中，所述胶质瘤干细胞(GSC)为4121GSC、3691GSC或387GSC。

上述应用中，所述抑制PHB基因表达或敲除PHB基因的物质可为利用PHB基因的特异shRNA降低PHB基因表达量的物质或利用CRISPR/Cas9基因敲除系统敲除PHB基因的物质。

利用PHB基因的特异shRNA降低PHB基因表达量的物质可为能特异降低PHB基因表达量的shRNA，或能表达所述shRNA的表达盒，或含有所述表达盒的重组载体，或含有所述重组载体的细胞系(不包括繁殖材料)。所述shRNA的序列为序列表中序列3。

利用CRISPR/Cas9基因敲除系统敲除PHB基因的物质可为能表达Cas9的表达盒(记为表达盒1)和能表达靶向PHB基因的sgRNA的表达盒(记为表达盒2)，或含有所述表达盒1和/或所述表达盒2的重组载体，或含有所述表达盒1和/或所述表达盒2的细胞系(不包括繁殖材料)。所述sgRNA的靶序列可为序列1或序列2。