[发明专利]牛病毒性腹泻病毒1型病毒样颗粒的制备及应用有效
申请号: | 202110323996.X | 申请日: | 2021-03-26 |
公开(公告)号: | CN112961224B | 公开(公告)日: | 2022-09-27 |
发明(设计)人: | 吴文学;王展慧;彭辰 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C07K14/18 | 分类号: | C07K14/18;C12N15/866;C12N15/62;A61K39/12;A61P31/14;A61P1/12 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 白艳 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 病毒性 腹泻 病毒 颗粒 制备 应用 | ||
1.一种制备牛病毒性腹泻病毒1型病毒样颗粒的方法,其特征在于:为利用杆状病毒昆虫表达系统将牛病毒性腹泻病毒1型的 Erns蛋白和E2蛋白组装成病毒样颗粒;
所述方法包括如下步骤:
1)将带有信号肽的牛病毒性腹泻病毒Erns蛋白的编码基因和带有信号肽的牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的编码基因插入pFastBac-Dual载体中,得到重组载体;
2)将所述重组载体转化大肠杆菌 DH10Bac,得到重组杆粒;
3)将所述重组杆粒转染Sf9细胞系,培养,收集细胞培养上清液,得到含有牛病毒性腹泻病毒1型病毒样颗粒的重组杆状病毒;
4)在所述收集细胞培养上清液后还包括用蔗糖密度梯度离心法纯化牛病毒性腹泻病毒1型病毒样颗粒的步骤;
所述牛病毒性腹泻病毒1型的Erns蛋白的氨基酸序列为序列表中序列2第26-252位;
所述牛病毒性腹泻病毒1型的E2蛋白的氨基酸序列为序列表中序列4第26-369位。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:
所述蔗糖密度梯度离心中的蔗糖浓度为10%、20%、30%,40%和50%。
3.由权利要求1-2中任一所述方法制备得到的牛病毒性腹泻病毒1型病毒样颗粒。
4.权利要求3所述的牛病毒性腹泻病毒1型病毒样颗粒在制备预防由牛病毒性腹泻病毒1型病毒感染的疾病或由牛病毒性腹泻病毒1型病毒引发的疾病的产品中的应用。
5.一种产品,其包括权利要求3所述的牛病毒性腹泻病毒1型病毒样颗粒;所述产品具有如下功能:预防由牛病毒性腹泻病毒1型病毒感染的疾病或由牛病毒性腹泻病毒1型病毒引发的疾病。
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