[发明专利]一种量子点直接标记抗体的方法及其装置有效
申请号: | 202110324898.8 | 申请日: | 2021-03-26 |
公开(公告)号: | CN113109555B | 公开(公告)日: | 2022-05-03 |
发明(设计)人: | 孙婵;唐菲菲;何乐春 | 申请(专利权)人: | 重庆新赛亚生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/533 | 分类号: | G01N33/533;G01N33/58 |
代理公司: | 重庆莫斯专利代理事务所(普通合伙) 50279 | 代理人: | 刘强 |
地址: | 400000 重*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 量子 直接 标记 抗体 方法 及其 装置 | ||
本发明公开了一种量子点直接标记抗体的方法及其装置,包括配QD‑COOH和MES溶液缓冲体系;将QD‑COOH活化;取抗体加入到已活化的QD‑COOH和MES缓冲体系,震荡搅拌,在37度温度下进行反应;加入BSA溶液以及加入NHS溶液于反应体系中,在37度温度下反应2~3h,终止反应;采用离心机离心,去除上层清液,加入MES溶液溶解沉淀,并充分震荡,用超声混匀;用MES缓冲体系透析得到合成产物,从而相比于现有技术可以提高产能,降低成本,简化工艺。
技术领域
本发明涉及纳米生物技术领域,尤其涉及一种量子点直接标记抗体的方法及其装置。
背景技术
量子点(QDs)是一种零维半导体纳米晶体,近似球形,直径1-12nm。量子点具有灵敏度高,稳定性好,激发光谱宽,发射峰窄,荧光寿命长和较大的斯托克斯位移等优势,是新一代荧光标记探针的最佳选择。使用量子点微球标记抗体制备试纸条可以使更多的发光分子连接到抗体上,从而使荧光信号值放大;可以克服外界环境对发光试剂如猝灭作用,增加发光试剂的稳定性;可减少荧光分子的泄露,降低量子点对活性的影响;同时可提高试纸条的灵敏度。
现有技术中偶联有链霉亲和素的量子点与生物素标记的抗体结合成本高,过程复杂,不利用批量使用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种量子点直接标记抗体的方法及其装置,旨在解决现有技术中偶联有链霉亲和素的量子点与生物素标记的抗体结合成本高,过程复杂,不利用批量使用的问题。
为实现上述目的,第一方面,本发明提供了一种量子点直接标记抗体的方法,包括:配制QD-COOH和MES溶液缓冲体系;将QD-COOH活化;取抗体加入到已活化的QD-COOH和MES缓冲体系,震荡搅拌,在37度的温度下进行反应;加入BSA溶液以及加NHS溶液于反应体系中,在37度温度下反应2~3h,终止反应;采用离心机离心,去除上层清液,加入MES溶液溶解沉淀,并充分震荡,用超声混匀;用MES缓冲体系透析得到合成产物。
其中,所述用MES缓冲体系透析得到合成产物之后,所述方法还包括:采用过柱的方式进行二次提纯。
其中,所述配制QD-COOH和MES溶液缓冲体系的具体步骤是:取100ul QD-COOH溶液,加入20ul 50~100mM/L MES溶液和50ul 0.8~1M/L NaCl溶液,再加入30ul去离子水,建立200ul QD-COOH和MES缓冲体系。
其中,所述将QD-COOH活化的具体步骤是:加入0.05~0.1g EDC和0.05~0.1g NHS于QD-COOH和MES缓冲体系中,充分震荡,搅拌均匀,在37度下反应15~60min。
第二方面,本发明提供一种量子点直接标记抗体的装置,包括:支撑组件、搅拌组件和加料组件,所述支撑组件包括第一管体、第二管体和管盖,所述第一管体与所述第二管体螺纹连接,并位于所述第二管体的一侧,所述管盖包括盖体和支管,所述盖体具有第一通孔和内螺纹,所述内螺纹位于所述第一通孔内,所述盖体和所述第二管体可拆卸连接,并位于所述第二管体远离所述第一管体的一侧,所述支管具有第二通孔和侧孔,支管与所述盖体固定连接,所述第二通孔与所述第一通孔连通,所述侧孔位于所述第二通孔的一侧,所述搅拌组件包括滑杆、拉紧弹簧、叶片、密封塞和密封柱,所述滑杆与所述支管滑动连接,并位于所述支管的一侧,所述拉紧弹簧与所述盖体固定连接,并位于所述盖体与所述滑杆之间,所述密封塞与所述滑杆固定连接,并位于所述侧孔的一侧,所述叶片与所述滑杆转动连接,并位于所述滑杆的一侧,所述密封柱与所述滑杆固定连接,并位于所述滑杆靠近所述第一管体的一侧,所述加料组件包括吸管、吸气体和支撑环,所述支撑环具有外螺纹,所述外螺纹与所述内螺纹配合,所述吸管与所述支撑环固定连接,并位于所述支撑环内,所述吸气体与所述吸管连通,并位于所述吸管的一侧。
其中,所述支撑组件还包括密封圈,所述密封圈与所述第一管体固定连接,并位于所述第一管体与所述第二管体连接处。
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