[发明专利]用于外泌体核酸检测的一体化芯片及检测方法和应用

权利要求书

1.一种用于外泌体核酸检测的一体化芯片，其特征在于，包括自芯片的一端依次设置的第一腔体部（1）、液滴生成部（2）和第二腔体部（3），所述第一腔体部（1）用于外泌体的PCR反应混合液的形成；所述液滴生成部（2）用于生成所述PCR反应混合液的液滴，所述第二腔体部（3）用于所述液滴的储存及PCR反应分析；

所述第一腔体部（1）与所述液滴生成部（2）的一端连通，所述液滴生成部（2）的另一端与所述第二腔体部（3）连通；

所述第一腔体部（1）包括第一腔体（11）、第一腔体入口（12）、第一腔体出口（13）、第一微通道（14）和第二微通道（15）；

所述第一腔体（11）位于芯片宽度方向的中央区域，于芯片宽度方向所述第一微通道（14）和所述第二微通道（15）分别位于所述第一腔体（11）的两侧；

所述第一腔体入口（12）通过所述第一微通道（14）与所述第一腔体（11）连通；所述第一腔体出口（13）通过所述第二微通道（15）与所述液滴生成部（2）连通；

所述液滴生成部（2）包括水相进样口（21）和水相通道（22），所述第二微通道（15）通过微管（16）与所述水相进样口（21）连通；所述水相通道（22）构造为呈迂回弯曲状；

所述液滴生成部（2）还包括油相进样口（23）以及分别与所述油相进样口（23）连通的第一油相通道（24）和第二油相通道（25），所述第一油相通道（24）和所述第二油相通道（25）对称设于所述水相通道（22）的两侧，所述第一油相通道（24）、所述第二油相通道（25）与所述水相通道（22）交汇形成十字交叉的液滴生成口；

所述液滴生成部（2）还包括引流结构（26），所述引流结构（26）设于所述液滴生成口处，所述引流结构（26）用于将所述液滴导入所述第二腔体部（3）。

2.根据权利要求1所述的用于外泌体核酸检测的一体化芯片，其特征在于，所述第一腔体（11）为通孔腔体，所述第一腔体（11）的上侧设有第一封闭层（4），所述第一封闭层（4）覆盖所述第一腔体部；所述第一腔体（11）的下侧设有第二封闭层（5），所述第二封闭层（5）覆盖芯片的下表面，所述第一封闭层（4）与所述第二封闭层（5）通过紧固件固定连接。

3.根据权利要求1所述的用于外泌体核酸检测的一体化芯片，其特征在于，所述第二腔体部（3）设有第二腔体入口和第二腔体（31），所述第二腔体入口用于流入自所述液滴生成口处生成的液滴；

所述第二腔体部（3）包括对准重叠设置的第一玻璃片和第二玻璃片，于芯片的宽度方向在所述第一玻璃片与所述第二玻璃片之间对称设有固化胶（32），所述固化胶（32）、所述第一玻璃片与所述第二玻璃片之间围成的空隙形成所述第二腔体（31）。

4.根据权利要求3所述的用于外泌体核酸检测的一体化芯片，其特征在于，所述第二腔体（31）构造为使所述液滴在所述第二腔体（31）内部单层分布。

5.根据权利要求1所述的用于外泌体核酸检测的一体化芯片，其特征在于，所述液滴生成部（2）与所述第二腔体部（3）之间设有预留空隙形成排气通道（27）。

6.一种权利要求1-5任一项所述的用于外泌体核酸检测的一体化芯片在外泌体核酸检测中的应用。

7.一种基于权利要求1-5任一项所述的用于外泌体核酸检测的一体化芯片的外泌体核酸检测方法，其特征在于，包括：

提供待检样品，将所述待检样品通入第一腔体部形成外泌体的PCR反应混合液；

将所述PCR反应混合液导入液滴生成部，并在液滴生成部生成液滴；

所述液滴流入第二腔体部，并将芯片转移至平板PCR仪上进行PCR反应；

将芯片转移至荧光显微镜下进行结果分析。