[发明专利]一种检测TEK基因突变位点的引物及试剂盒

说明书

本发明公开了一种检测TEK基因突变位点的引物，包括10对引物对。本发明还公开了一种检测TEK基因突变位点的试剂盒。本发明通过检测TEK基因的10个突变中的任一突变位点，可有效筛选出易患原发性先天性青光眼的疑似患者。本发明的检测方法快速、准确、高效；可用于原发性先天性青光眼患者的分子诊断和鉴别诊断，为原发性先天性青光眼患者的早期诊断、早期治疗提供科学依据。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体地说，是关于一种检测TEK基因突变位点的引物和检测试剂盒。

背景技术

青光眼是一组以视神经损害为主要特征，病理性眼压升高是其主要危险因素的疾病，该病是导致人类失明的三大致盲眼病之一，总人群发病率为1％，45岁以后为2％。临床上通常将青光眼分为原发性青光眼、继发性青光眼、儿童(发育)性青光眼三种类型。原发性先天性青光眼(primary congenital glaucoma,PCG)是一种好发于婴幼儿的遗传性致盲性眼病，是先天性青光眼中最为常见的类型，典型的临床表现是畏光、流泪、眼睑痉挛，角膜增大、浑浊水肿，眼压增高，最终导致视神经萎缩。该病男女发病率比例约为2.7:1，多为散发，治疗效果较差，并且一旦致盲便无法复明。因此早期诊断早期治疗是防治此类青光眼病人视功能进行性损害的有效途径。

随着基因研究技术的发展，越来越多的青光眼相关致病基因、位点及相关基因突变被发现，有助于进一步明确青光眼的分子发病机制。迄今已有报道，CYP1B1、LTBP2、MYOC和TEK是与原发性先天性青光眼密切相关的几组基因，其中TEK基因是最新发现的与原发性先天性青光眼相关的基因，TEK基因位于9号染色体短臂近端(9p21)，其编码的蛋白又名Tie-2，是血管生成素受体，属于受体酪胺激酶家族，受配体血管生成素-1(ANGPT1)激活发挥其促进血管生成及维持血管稳态的作用。TEK受体具有独特的细胞外结构域，其含有2个免疫球蛋白样环，由3个表皮生长因子样重复序列分开，重复序列与3个纤连蛋白III型重复序列相连。TEK在房角结构中的表达主要集中在内皮细胞、集液管及血管内皮细胞。Souma等人在189个多种族先天性青光眼家系中鉴定到了10种可能的致病突变，共涉及10个家系。TEK基因为常染色体显性遗传，然而多数患儿携带同样致病基因的父母并无表型，提示该基因的突变有一定的外显率。致病的TEK突变主要为无义突变、错义突变、重复或缺失突变及移码突变等。后续的细胞功能试验提示这些突变可以通过不同的途径影响TEK蛋白的正常功能，包括蛋白表达、蛋白降解、蛋白亚细胞定位、蛋白对于配体刺激的反应等。早期诊断和早期治疗是防治PCG患者视功能进行性损害的有效途径，因此PCG的相关基因检测对其临床诊断、治疗方案制定和预后评估都具有非常重要的意义，而PCG致病基因的全面揭示是基因检测的基础和前提。PCG具有复杂的临床表现，是一类具有遗传异质性的先天发育性疾病，表现多样，病情复杂，预后不佳，特别是该病在中国人群中非常罕见，具有诊断价值的致病位点较少。因而，急需确定PCG的致病基因及检测方法，以此用于快速准确的基因诊断。

发明内容

本发明针对现有的技术不足，其目的是研究一种可以快速、准确检测原发性先天性青光眼的检测试剂盒，以便于医生对原发性先天性青光眼相关疾病进行临床分析。经研究，本发明的检测试剂盒可以辅助检测原发性先天性青光眼。因此，本发明的第一个目的是提供一种检测TEK基因突变位点的引物。本发明的第二个目的是提供一种检测TEK基因突变位点的试剂盒。本发明的第三个目的是提供一种检测检测TEK基因突变位点的检测方法。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：