[发明专利]猫常见病毒多重PCR快速检测试剂盒及其引物组

说明书

本发明公开了猫常见病毒多重PCR快速检测引物组，包括针对FCV、FPV、FIV、FHV‑1四种猫呼吸道及肠道病毒的四对PCR引物，它们分别具有序列表SEQ.ID.NO.1至SEQ.ID.NO.8的碱基序列。据此，发明人还研制了对应的快速检测试剂盒。应用本发明可在同一反应管内同时检测FCV、FPV、FIV、FHV‑1四种猫常见病毒的单个或混合感染，具有特异性高、敏感性好、耗时短且成本低的特点，它对重组质粒标准品的检出量可低至4.45×10¹copies/μL。本发明为猫科动物混合感染的检测提供了快速简便的工具，为临床快速鉴别检测及实验室流行病学调查奠定坚实的基础，有利于宠物诊疗业及时制定治疗方案，减少猫科动物死亡率，对于公共卫生安全有重要意义。

技术领域

本发明属于猫呼吸道及肠道病毒核酸检测技术领域，尤其涉及一种猫常见病毒多重PCR快速检测试剂盒及其引物组。

背景技术

近年来，随着宠物行业的兴起，猫群发生多种病原混合感染的情况愈加普遍。猫杯状病毒(FCV)、猫细小病毒(FPV)、猫流感病毒(FIV)和猫疱疹病毒Ⅰ型病毒(FHV-1)是在猫科动物中流行的主要病原体，由于其病理变化在临床症状及流行病学上的相似性，难以区分这些疾病。同时，根据发明人对猫疱疹病毒Ⅰ型病毒(FHV-1)的监测发现，其在临床病例中较为常见，且呼吸道病毒感染的协同性、继发性会严重危害患猫的身体健康。上述疾病在猫科动物中的混合感染给实验室诊断和临床治疗带来巨大的挑战。

猫杯状病毒(Feline calicivirus，FCV)是猫的一种高度传染性病原体，在猫科动物中广泛分布。该病主要引起猫科动物上呼吸道疾病及口腔溃疡等临床症状，死亡率高达50％左右。除呼吸道症状外，感染的猫还可出现发热、黄疸、皮肤水肿、皮肤水肿和溃疡性皮炎等症状，且该病毒基因组变异性强，接种疫苗常缺乏有效的保护作用，对猫科动物的健康造成严重的威胁。

猫细小病毒(Feline parvovirus，FPV)是猫及猫科动物的一种高度传染性和致死性疾病病原体，患猫常出现高热、呕吐、腹泻，肠炎等，使白细胞大大减少，故又称猫泛白细胞减少症病毒。6月龄以下的幼猫更易感，发病率和死亡率均高于成年猫，通过呼吸道或消化道均可传播。此外，妊娠期母猫感染可导致流产或木乃伊胎，甚至导致胎儿中枢神经、大脑、小脑和视神经等损伤，致其残疾。虽然疫苗免疫和抗体治疗对细小病毒病的预防和治疗起到了至关重要的作用，但该病毒对外界的抵抗力较强，以及宠物主错误的认为室内猫无需接种疫苗，所以该病仍然普遍流行，严重危害猫科动物的健康。

猫流感病毒(Feline influenza virus，FIV)主要在猫及猫科动物中通过呼吸道传播，患猫可能表现为咳嗽、打喷嚏、流鼻涕、高热、气喘和精神沉郁，甚至死亡。目前，已从猫及猫科动物身上分离到的流感病毒亚型包括：H1N1、H5N1、H3N2、H5N6及H7N2等。这说明，流感病毒在哺乳动物中突破种间屏障的情况愈发常见。猫被证实对流感病毒较为易感，是否意味着猫可以作为流感病毒潜在的“混合容器”，需要通过建立快速敏感的方法进行监测，为流感病毒从猫传播给人提供提前预警。

猫疱疹病毒I型(Felidherpesvirus1，FHV-1)可引起猫传染性鼻气管炎，是一种以侵害猫科动物上呼吸道和眼结膜为主的急性、高度接触性传染病。该病在临床上发病率接近100％，病死率约为50％，除接触和飞沫传播外，还可通过发情期交配传播和垂直传播。幼猫对该病毒更易感，病猫主要表现为发热、体温升高、精神沉郁、眼鼻分泌物增多、打喷嚏，呈典型上呼吸道感染症状；有些病猫表现出舌和硬腭溃疡、呼吸困难等症状；此外，疱疹性角膜炎表现出的严重树枝状溃疡常作为示病症状。疱疹病毒一般潜伏于动物的三叉神经中，免疫力低下及应激的时候可发病，且治愈后终生会复发感染，损害猫科动物的健康，所以监测FHV-1流行情况是很有必要的。