[发明专利]一种PD-L1靶向双模态分子探针及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种PD-L1靶向双模态分子探针，其特征在于，其为同时由吲哚菁绿ICG和正电子放射性核素⁶⁸Ga标记的多肽，所述多肽的序列如SEQ ID NO.1所示。

2.根据权利要求1所述的PD-L1靶向双模态分子探针，其特征在于，所述ICG和⁶⁸Ga分别通过双功能螯合剂DOTA与所述多肽连接。

3.根据权利要求1或2所述的PD-L1靶向双模态分子探针，其特征在于，所述ICG通过双功能螯合剂DOTA与所述多肽连接得到的分子结构如式(I)所示：

4.权利要求1～3任一项所述的PD-L1靶向双模态分子探针的衍生物，其特征在于，所述衍生物为所述双模态分子探针的二价体或多价体且能够特异性结合PD-L1；

所述二价体或多价体为二个或多个所述双模态分子探针通过连接分子共价连接形成，或者，通过与多聚体混合、非共价连接形成；

优选地，所述的连接分子为2-S-(4-氨基苯)-1,4,7三氮杂环壬烷-1,4,7-三乙酸(NOTA)、1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺(EDC)或N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)；

和/或，所述多聚体为聚乙二醇(PEG)、聚乙烯醇(PVA)、环糊精、聚酰胺-胺型树枝状高分子(PAMAM)、聚乳酸(PLA)、聚乳酸-乙醇胺(PLGA)中的任意一种或至少两种的组合。

5.权利要求1～3任一项所述的PD-L1靶向双模态分子探针或权利要求4所述的衍生物在制备药物中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述药物为用于PD-L1阳性肿瘤的预防、诊断或治疗的药物；

优选地，所述PD-L1阳性肿瘤为选自黑色素瘤、非小细胞肺癌、肾癌、前列腺癌、结直肠癌、胰腺癌、肝癌、胃癌、食道癌和乳腺癌中的任意一种。

7.一种药物，其特征在于，包括权利要求1～3任一项所述的PD-L1靶向双模态分子探针或权利要求4所述的衍生物。

8.根据权利要求7所述的药物，其特征在于，所述药物还包括显像制剂；

优选地，所述药物中，所述双模态分子探针、其二价体或多价体与所述显像制剂相缀合或混合；

更优选地，所述的显像制剂为放射性核素、放射性核素标记物、磁共振造影剂、分子影像制剂中的任意一种。

9.权利要求1～3任一项所述的PD-L1靶向双模态分子探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将序列如SEQ ID NO.1所示的多肽与DOTA连接，得到PDP线性多肽；将所述PDP线性多肽进行ICG标记后，再进行⁶⁸Ga标记。

10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)CK(DOTA)NTYYEDQG的制备

先通过Fmoc固相合成Fmoc-CK(Dde)NTYYEDQG，用2％水合肼将Lys的侧链保护基Dde脱掉暴露氨基后得到Fmoc-CKNTYYEDQG，将DOTA和Fmoc-CKNTYYEDQG多肽溶于DMF中，用DIEA调节pH值至8.5-9.0，室温搅拌过夜；加入20％哌啶脱保护，室温反应10分钟；得到的产品经C18半制备柱HPLC分离纯化，得到PDP线性多肽CK(DOTA)NTYYEDQG；

(2)ICG-CK(DOTA)NTYYEDQG的制备

将1mg CK(DOTA)NTYYEDQG多肽溶于1×PBS中，0.5mg ICG-MAL溶于500μL去离子水中，将二者混合调pH至7.4，室温振荡反应24h，冷冻干燥后进行质谱检测和HPLC纯化；

(3)ICG-CK(⁶⁸Ga-DOTA)NTYYEDQG的制备

将ICG-CK(DOTA)NTYYEDQG溶于去离子水中；用5mL 0.1mol/L高纯度盐酸溶液淋洗锗镓⁶⁸Ge/⁶⁸Ga发生器，收集其中放射性含量最高的1mL，加入醋酸钠将混合液pH值调至3.5-4.5；将30μg前体ICG-CK(DOTA)NTYYEDQG加入至所述混合液中并充分混匀，加热至100℃保持10min，得到ICG-CK(⁶⁸Ga-DOTA)NTYYEDQG。