[发明专利]一种具有抗氧化活性的酚酸类化合物及其应用

说明书

本发明公开了一种具有抗氧化活性的酚酸类化合物及其应用，该酚酸类化合物以桫椤茎干，依次采用无水乙醇冷凝回流提取、ODS中压柱、Sephadex LH‑20及液相分离制备，该提取分离方法简单、快速且环保，用该方法分离得到的化合物纯度很高，药理活性测定实验证明Alsophilin具有较好的抗氧化活性，因此所述的一种从桫椤茎干中提取的酚酸类化合物及其盐和衍生物可作为天然产物开发中药新药，具有广阔的医药应用前景。

技术领域

本发明属于化合物分离技术领域，涉及从桫椤茎干中提取、分离和鉴定出的新化合物及其提取分离方法，具体为桫椤茎干中一种具有抗氧化活性的酚酸类化合物及其提取分离方法和应用。

背景技术

桫椤(Alsophila spinulosa(Wall.ex Hook.)R.M.Tryon)是一种著名的孑遗植物，属桫椤科(Cyatheaceae)桫椤属(Alsophila)，别名树蕨、蛇木等，是现存唯一的木本蕨类植物，高度可达数米，有“蕨类植物之王”的美誉。1985年，《中华人民共和国药典》收录了桫椤干燥茎干薄片可以入药，被称为“龙骨风”，有很好的药用价值，具有清热解毒、润肺止咳、除湿祛风等功效，和驱除蠕虫感染，减缓流感咳嗽和肝炎等。

桫椤的现代药理学研究表明，其具有抗炎症、抗肿瘤、抗菌、抗氧化等功效，民间有用桫椤叶片煎煮喝汤来祛痰止咳、清热解暑的用途。根据研究报道，桫椤的主要次生代谢化合物包括黄酮类，萜类，甾体，生物碱等。近年来，对桫椤化合物分离及其药理活性的研究几乎没有，并且从未报道过一种新酚酸类的化合物的分离及其体外药理活性研究。

目前从桫椤中分离出的次生代谢产物较少，且大都为已知化合物，结构新颖性低，因此，对桫椤中新化合物的开发和分离是亟待需求的。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从桫椤茎干中提取的新化合物Alsophilin及其提取分离方法和应用，本发明提供从桫椤茎干中提取的新化合物，经研究发现该酚酸类化合物具有显著的抗氧化作用，同时该化合物的提取分离方法简便、快捷且环保，分离得到的化合物纯度高。

本发明具体通过以下技术方案实现：

一种具有抗氧化活性的酚酸类化合物，所述化合物的分子式为C₂₇H₂₀O₉，俗名为Alsophilin，化学结构式如下：

在本发明的另一方面，提供了上述酚酸类化合物的提取分离方法，包括以下步骤：

1)取新鲜桫椤茎干阴干并粉碎，采用冷凝回流提取，取滤液减压浓缩的浸膏；

2)将得到的浸膏用纯水重悬后用乙酸乙酯萃取，萃取的乙酸乙酯层减压蒸干，得到乙酸乙酯提取物；

3)将获得的乙酸乙酯提取物经预处理的ODS反向中压柱(Octadecylsilyl，十八烷基硅烷键合硅胶填料)层析分离，洗脱经薄层色谱检测，将显色的洗脱馏份减压旋转浓缩蒸干，备用；

4)将步骤3)所得浓缩物经预处理的葡聚糖凝胶柱(SephadexLH-20)层析分离，洗脱经薄层色谱检测，将显色的洗脱馏份减压浓缩蒸干，备用；

5)对步骤4)所得到的浓缩物进行HPLC分离，制备得到酚酸类化合物Alsophilin。

进一步的，步骤1)中采用无水乙醇冷凝回流提取，每次回流提取2小时，无水乙醇的用量按照3L/kg药材，并反复提取4次，合并4次的提取液。

进一步的，步骤3)中采用甲醇-水梯度洗脱，甲醇和水的体积比为30:70、40:60、50:50、60:40、80:20、100:0梯度洗脱。

进一步的，所述ODS与葡聚糖凝胶的预处理过程为甲醇浸泡超过24小时，上柱后，用甲醇洗脱，直到滴入水中无浑浊，再用初始流动相平衡。