[发明专利]血型不规则抗体特异性鉴定方法及其试剂

权利要求书

1.一种血型不规则抗体特异性鉴定方法，其包括以下步骤：

(a)制备特异性血型抗体Fab段；

(b)鉴定不完全抗体的特异性。

2.根据权利要求1所述的血型不规则抗体特异性鉴定方法，其中步骤(a)进一步包括取特异性血型抗体IgG，例如抗D、抗E、抗c、抗e、抗K，用木瓜蛋白酶或胃蛋白酶进行处理，制备出所述特异性血型抗体Fab片段；对于部分血型系统的特异性鉴定，还可以用木瓜蛋白酶或胃蛋白酶制备IgM的Fab片段，或制备IgG与IgM的Fab片段的混合物。

3.根据权利要求2所述的血型不规则抗体特异性鉴定方法，其中步骤(a)中所述特异性血型抗体IgG可选择自行制备的多克隆抗体或单克隆抗体，或市售的血型试剂。

4.根据权利要求1所述的血型不规则抗体特异性鉴定方法，其中步骤(b)进一步包括：

(1)发现不规则抗体；

(2)初步推断不规则抗体的特异性的类别；

(3)制备致敏红细胞；

(4)将被检血清与致敏红细胞或相应抗原阳性的红细胞进行反应；

(5)判定结果。

5.根据权利要求4所述的血型不规则抗体特异性鉴定方法，其中步骤(b)中的子步骤(1)包括在交叉配血、抗体筛检、新生儿溶血病检查及输血反应检查中发现血液中含有所述不规则抗体。

6.根据权利要求4所述的血型不规则抗体特异性鉴定方法，其中步骤(b)中的子步骤(2)包括根据抗体的血型血清学特点来初步推测抗体特异性的范围；其进一步包括通过检查被检红细胞的相关抗原来推定不规则抗体的特异性。

7.根据权利要求4所述的血型不规则抗体特异性鉴定方法，其中步骤(b)中的子步骤(3)包括用由子步骤(2)推出的可能性较大的不规则抗体的Fab片段，与已知相应抗原阳性的红细胞共同孵育，在特定的温度、离子强度、pH值的条件下，使之充分致敏；然后洗涤，配成2％～5％的细胞悬液待用。

8.根据权利要求7所述的血型不规则抗体特异性鉴定方法，其中对于红细胞ccdee表型，其可能性较大的不规则抗体为抗D、抗E与抗C，可以选择抗D(Fab)与D抗原阳性红细胞共同孵育、抗E(Fab)与E抗原阳性红细胞共同孵育或抗C(Fab)与C抗原阳性红细胞共同孵育，以制备所述致敏红细胞。

9.根据权利要求4所述的血型不规则抗体特异性鉴定方法，其中步骤(b)中的子步骤(4)包括取所述被检血清，相应的所述致敏红细胞2％～5％悬液，分别在2℃～39℃、优选在4℃、22℃、37℃，于盐水、酶介质、聚凝胺介质或抗人球蛋白的介质中反应，同时用所述被检血清与所述相应抗原阳性的红细胞做平行对照实验。

10.根据权利要求4所述的血型不规则抗体特异性鉴定方法，其中步骤(b)中的子步骤(5)包括：①在所述被检血清与对照细胞出现凝集同时与所述致敏红细胞不出现凝集的情况下，说明红细胞上相应的抗原被Fab封闭，所述被检血清中抗体的特异性与Fab的特异性一致；②在所述被检血清与对照实验出现凝集但与所述致敏红细胞也出现凝集的情况下，有两种可能性：一是所述被检血清的抗体特异性与Fab段特异性不一致；二是所述被检血清中含有2个以上的复合抗体，需要做进一步鉴定，即，用不同特异性的Fab组合分别致敏红细胞，再观察分析结果，做出判断；③在对照实验不出现凝集的情况下，说明实验过程出现差错，实验结果不可靠，需要重新检查各项实验条件，或更换适当的对照红细胞，重新进行实验。

11.一种血型不规则抗体特异性鉴定试剂，其为根据权利要求1所述的血型不规则抗体特异性鉴定方法的步骤(a)中制备的特异性血型抗体Fab段。