[发明专利]一种用于灭菌效果监测的生物指示剂及其制备方法

权利要求书

1.一种用于芽孢萌发生长的培养基，其特征在于：它是由如下重量百分比的原料制备而成：

胰酪蛋白胨0.5～1.5％，脑心浸出液肉汤0.5～1.5％，果糖0.2～0.4％，葡萄糖0.1～0.3％，氯化钾0.05～0.15％，磷酸盐0.05～0.15％，，吐温80 0.05～0.2％，丙氨酸0.3～0.7％，赖氨酸0.05～0.15％，缬氨酸0.05～0.15％，2,6-吡啶二羧酸0.17～0.25％，CaCl₂0.10～0.18％，氯化锰0.0005-0.0015％，4-甲基伞形酮酰-α-D-吡喃葡糖苷(4-MUG)0.01～0.03％，溴甲粉紫0.001～0.003％，其余为pH 7.4-7.8水溶液。

2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于：它是由如下重量百分比的原料制备而成：

胰酪蛋白胨1％，脑心浸出液肉汤培养基1％，果糖0.3％，葡萄糖0.2％，氯化钾0.1％，磷酸盐0.1％，吐温80 0.1％，丙氨酸0.5％，赖氨酸0.1％，缬氨酸0.1％，2,6-吡啶二羧酸0.21％，CaCl₂0.14％，氯化锰0.001％，4-甲基伞形酮酰-α-D-吡喃葡糖苷(4-MUG)0.02％，溴甲粉紫0.002％，其余为pH 7.4-7.8水溶液。

3.根据权利要求1或2所述的培养基，其特征在于：所述磷酸盐为磷酸氢二钾；所述丙氨酸为L-丙氨酸；所述赖氨酸为L-赖氨酸；所述缬氨酸为L-缬氨酸。

4.一种生物指示剂，其特征在于，它包括芽孢和权利要求1～3任意一项所述培养基；所述培养基与芽孢的体积菌落数配比为0.7mL：1×10⁵～1×10⁶CFU，优选0.7mL：1×10⁶CFU。

5.根据权利要求4所述的生物指示剂，其特征在于：所述芽孢为嗜热脂肪芽孢杆菌Bacillus stearothermophilus的休眠体。

6.根据权利要求3或4所述的生物指示剂，其特征在于：所述芽孢附着在载体上；所述载体为纸片，规格为0.5～1×1～3cm，优选特卫强纸，规格为0.5×2cm。

7.一种权利要求1～3任意一项所述培养基的制备方法，其特征在于：它包括如下步骤：

(1)按权利要求1所述配比称取原料；

(2)取4-MUG，用二甲亚砜溶解得4-MUG溶液；取L-丙氨酸、L-赖氨酸、L-缬氨酸，加配方量5％的蒸馏水溶解，得氨基酸溶液；取剩余原料，加配方量95％的蒸馏水溶解，调节pH值至7.4-7.8，灭菌，得培养基母液；

(3)将步骤2)氨基酸溶液与4-MUG溶液，混合，过滤除菌，再与步骤2)培养基母液混合，即得培养基。

8.权利要求4～6任意一项所述生物指示剂的制备方法，其特征在于：它包括以下步骤：

a、取芽孢，附着于载体上，得菌片；

b、将步骤a的菌片与权利要求1所述培养基分别置于同一生物指示剂容器中，即得。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于：所述芽孢单面附着于载体上；所述载体为纸片，规格为0.5～1×1～3cm，优选，特卫强纸，规格0.5×2cm；所述培养基与芽孢的体积菌落数配比为0.7mL：1×10⁵～1×10⁶CFU，优选0.7mL：1×10⁶CFU；所述菌片附着有芽孢的一面朝向生物指示剂容器的管壁，并固定于生物指示剂容器中；所述芽孢为嗜热脂肪芽孢杆菌Bacillus stearothermophilus的休眠体。

10.权利要求3～6任意一项所述的生物指示剂在制备监测生物灭菌效果的试剂中的用途；所述试剂是监测化学试剂灭菌、射线灭菌、干热灭菌、湿热灭菌和/或过滤除菌的试剂，优选监测湿热灭菌的试剂，更优选监测蒸气加压灭菌。