[发明专利]抗单链DNA抗体作为先天性巨结肠诊断标志物的应用

说明书

本发明涉及生物医药技术领域，具体而言，涉及一种抗单链DNA抗体作为先天性巨结肠诊断标志物的应用。通过人自免抗原芯片筛选先天性巨结肠患儿的血浆，得到先天性巨结肠患儿血浆高表达的抗单链DNA(ssDNA)抗体。并在独立的样品中用酶联免疫(ELISA)的方法验证了抗单链DNA(ssDNA)抗体的有效性。该抗单链DNA(ssDNA)抗体能有效诊断先天性巨结肠患儿，AUC为0.9167；最佳界限对应灵敏性为74.63％，特异性为96.88％。抗单链DNA(ssDNA)抗体可以作为先天性巨结肠血浆诊断标记物，用于疾病的筛查和诊断，填补了先天性巨结肠血浆诊断的空白。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体而言，涉及一种抗单链DNA抗体作为先天性巨结肠诊断标志物的应用。

背景技术

先天性巨结肠(Hirschsprung disease，HSCR)是一种儿童肠神经发育异常的出生缺陷疾病，病理机制为肠神经嵴细胞迁移和分化成肠神经元发生障碍，导致肠神经缺乏而发生持续性痉挛，是小儿常见的先天性肠道疾病之一。先天性巨结肠的早期表现为呕吐、腹胀、腹泻等，临床上会造成新生儿死亡或手术后反复肠炎、难治性便秘等并发症，严重影响患儿的生长发育和生活质量。

先天性巨结肠的及时诊治可以减少先天性巨结肠肠炎发生的危险，获得良好的预后。该疾病确诊需要术后病变组织的病理切片。术前诊断方法主要为钡剂灌肠，直肠活检、直肠测压，以判断是否要实施“巨结肠根治术”。目前，钡灌肠为最重要的诊断方法，原理为先天性巨结肠患儿的肠道存在无神经节段的狭窄、近端的扩张，钡灌肠后可见扩张和狭窄段而诊断为巨结肠。但该方法只能诊断出有典型肠道形态改变的患儿，灵敏度需要提高，诊断的准确度80％左右。直肠活检是直接取直肠组织，检测是否有神经节细胞的缺失，准确率高，但取样部位对结果有影响。该方法为介入有创型，且价格非常高，一般情况下该方法应用于钡灌肠不明显，或不适用的患儿，比如当患儿有坏死性小肠结肠炎(NEC)这种可能的时候，钡灌肠会导致肠穿孔，这种时候不适合用钡灌肠去诊断，才考虑用直肠活检。直肠测压是通过检测肛门内括约肌的松弛缺乏判定肠神经的支配异常，仅为辅助诊断方法，假阳性和假阴性都较多，不能用于单独检测。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

为克服上述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种先天性巨结肠诊断标记物抗单链DNA(ssDNA)抗体及其应用，为先天性巨结肠的诊断提供了一种新的、准确、灵敏的检测途径。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

本发明涉及检测剂在制备先天性巨结肠诊断试剂、试剂盒或试纸条中的应用，所述检测剂包括抗单链DNA抗体的定量检测剂。

可选的，如上所述的应用，所述抗单链DNA抗体为抗单链DNA IgG抗体。

可选的，如上所述的应用，所述检测剂还包括抗NMDAR抗体的定量检测剂。

可选的，如上所述的应用，所述抗NMDAR抗体为抗NMDAR IgG抗体。

可选的，如上所述的应用，所述检测剂用于执行如下任一方法：

放射免疫法、间接免疫荧光法、斑点免疫金渗滤法、生物质谱法、免疫印记法和酶联免疫吸附法。

可选的，如上所述的应用，所述检测剂为抗原，所述抗原包括ssDNA以及任选的NMDAR蛋白。

可选的，如上所述的应用，所述抗原缀合于固相支持物上。

可选的，如上所述的应用，所述固相支持物选自试管、EP管、多孔板、微量反应板凹孔和微球。

可选的，如上所述的应用，所述检测剂还包括抗人Ig抗体。

可选的，如上所述的应用，所述抗人Ig抗体为抗人IgG抗体。