[发明专利]微流控芯片、循环肿瘤细胞自动化分离检测系统及方法

权利要求书

1.一种微流控芯片，其特征在于，包括密度梯度离心组件、细胞捕获组件以及试剂存储组件；所述密度梯度离心组件用于对全血样本进行密度梯度离心以实现分离得到血浆层、单核细胞层、Ficoll液层、红细胞和粒细胞层，所述细胞捕获组件包括捕获通道以及连通所述捕获通道的捕获入口、捕获出口，所述捕获通道的内壁上沿着所述捕获入口至所述捕获出口方向依次顺序设置具有多个捕获孔以及多个负压捕获腔室，各个所述捕获孔对应连通一个所述负压捕获腔室，所述捕获孔的开口为花瓶口型的开口形状，所述捕获孔的朝向所述捕获通道的开口的径向尺寸小于所述捕获孔内部的径向尺寸，所述捕获入口与所述密度梯度离心组件连通以用于获取单核细胞层，所述捕获出口用于连通负压源，所述负压捕获腔室的尺寸大于一个外周血循环肿瘤细胞的尺寸且小于两个外周血循环肿瘤细胞的尺寸，所述试剂存储组件与所述捕获入口连通以用于存储染色液以及洗涤液。

2.根据权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述捕获通道沿着所述微流控芯片使用状态时的竖直方向迂回状分布。

3.根据权利要求2所述的微流控芯片，其特征在于，所述捕获孔位于所述捕获通道的下壁。

4.根据权利要求1-3任意一项所述的微流控芯片，其特征在于，所述试剂存储组件包括与所述捕获入口连通的多个染色液存储室以及多个洗涤液存储室。

5.根据权利要求1-3任意一项所述的微流控芯片，其特征在于，所述微流控芯片还包括废液室，所述废液室与所述捕获出口连通，所述废液室设置有用于连通负压源的负压孔。

6.一种外周血循环肿瘤细胞自动化分离检测系统，其特征在于，包括细胞检测仪以及权利要求1-5任意一项所述的微流控芯片，所述细胞检测仪用于检测所述微流控芯片中的所述负压捕获腔室内的外周血循环肿瘤细胞的数量。

7.一种使用权利要求6所述的外周血循环肿瘤细胞自动化分离检测系统的外周血循环肿瘤细胞自动化分离检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

向细胞检测仪的加样口内先后加入Ficoll分离液以及全血样本，Ficoll分离液以及全血样本进入先后进入微流控芯片的密度梯度离心组件中，对所述密度梯度离心组件进行密度梯度离心分层得到血浆层、单核细胞层、Ficoll液层、红细胞和粒细胞层，通过捕获出口对捕获通道施加负压，使得单核细胞层内的单核细胞及外周血循环肿瘤细胞进入捕获通道中，并通过捕获孔进入负压捕获腔室内；

通过试剂存储组件向捕获入口内加入第一染色液，固定细胞预定时间，加入第一洗涤液以洗涤第一染色液，加入第二染色液，染色预定时间，加入第二洗涤液，清洗多余的第二染色液；

通过细胞检测仪获取所述微流控芯片上的单个或者多个负压捕获腔室的图像，进行细胞形态学鉴定。

8.根据权利要求7所述的外周血循环肿瘤细胞自动化分离检测方法，其特征在于，固定细胞1-2min，和/或，染色3-5min。