[发明专利]桃金娘提取物抗菌剂的制备及其抑菌作用

说明书

本发明提供几种桃金娘提取物制成的抗菌剂分别来自桃金娘水提取物、乙醇提取物、丙酮提取物、乙酸乙酯提取物、石油醚提取物、甲醇提取物和正己烷提取物，实验表明它们各自对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和真菌的生长具有一定的抑制作用。以桃金娘科桃金娘属植物桃金娘的叶片为原料，经过适当粉碎后采用不同浓度和比例的溶剂以一定工艺条件提取、加工得到不同的桃金娘提取物制剂。本发明的桃金娘提取物，制备工艺易于实现工业化，所得提取物制剂抗菌效果显著，具有抑菌广谱性，可作为替代抗生素广泛应用于牲畜饲料中，为植物源抗菌剂在饲料工业上的应用提供良好的愿景。

技术领域

本发明属于天然植物抗菌剂领域，具体涉及桃金娘提取物抗菌剂在抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念球菌生长繁殖的作用。

背景技术

已有研究表明桃金娘科桃金娘属桃金娘植物的果实和叶子提取物经分离纯化可得到上百种化合物，其中具有多种显著抗菌作用的化合物。对于桃金娘中具体化合物的抗菌效能的研究较多，而对于将其抗菌性能应用到饲料工业中作为天然植物提取物来源的抗菌剂的应用尚未有报道，因此，本发明研制桃金娘提取物抗菌剂，探索了不同提取剂，比较了不同制剂方法对桃金娘抗菌剂的抗菌效果的影响，测定了其对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和真菌的影响，初步确定了桃金娘叶片提取物作为饲料工业中替抗产品的潜力，为今后开发植源性抗菌产品提供了理论基础和实践方法。

发明内容

本发明解决的技术问题是：针对饲料工业上植源性抗菌剂的缺乏，提供了桃金娘叶提取物抗菌剂的制备及其抑菌效果评价。

上述的抑菌作用实际上是指对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念球菌的抑制。

上述的桃金娘提取物指的是水提取物、乙醇提取物、丙酮提取物、乙酸乙酯提取物、石油醚提取物、甲醇提取物和正己烷提取物。其中乙醇提取物采用的提取剂是浓度为20%-100%的乙醇水溶液。

上述的抗菌剂剂型为颗粒剂和粉剂，桃金娘提取物通过真空干燥或喷雾干燥得到颗粒或粉末状产品。

本发明的乙醇提取物抗菌剂对于金黄色葡萄球菌具有显著的抑制效果，对于大肠杆菌和白色念球菌也有较强的抑制作用。

本发明的丙酮提取物抗菌剂和乙酸乙酯提取物抗菌剂对于金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念球菌都具有较强的抑制作用。

本发明中提供的桃金娘水提取物、乙醇提取物、丙酮提取物、乙酸乙酯提取物、石油醚提取物、甲醇提取物、正己烷提取物对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度分别是1.25mg/ml，0.6mg/ml，2.5mg/ml，5.0mg/ml，2.5mg/ml，0.6mg/ml，1.25mg/ml。

本发明中提供的桃金娘水提取物、乙醇提取物、丙酮提取物、乙酸乙酯提取物、石油醚提取物、甲醇提取物、正己烷提取物对大肠杆菌的最低抑菌浓度分别是5.0mg/ml，2.6mg/ml，5.0mg/ml，20.0mg/ml，5.0mg/ml，5.0mg/ml，7.5mg/ml。

本发明中提供的桃金娘水提取物、乙醇提取物、丙酮提取物、乙酸乙酯提取物、石油醚提取物、甲醇提取物、正己烷提取物对白色念球菌的最低抑菌浓度分别是5.0mg/ml，10.0mg/ml，5.0mg/ml，5.0mg/ml，5.0mg/ml，5.0mg/ml，5.0mg/ml。

具体实施方式

供试植物和菌株

桃金娘科桃金娘属的桃金娘叶来自广东揭阳市，金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念球菌由中国科学院华南植物园天然产物化学和生物学组提供。

三种供试菌液的制备: 取金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念球菌培养在37 ℃恒温培养箱中12h，用培养基稀释，通过测定OD₆₀₀为0.070左右，得到1.25×10⁶CFU/mL的供试菌液。

连续二倍稀释法: