[发明专利]木蹄层孔菌胞外多糖的应用

说明书

本发明设计药物技术领域，具体涉及一种木蹄层孔菌胞外多糖的应用，该木蹄层孔菌胞外多糖可用于制备皮肤创面愈合剂，特别是可用于制备皮肤烫伤愈合剂；具体的：木蹄层孔菌胞外多糖可以有效的抑制创面的炎症反应、促进小鼠细胞因子的生成，加快组织修复与再生，对小鼠烫伤皮肤的愈合有很好的效果。本发明为创面愈合药剂的制备提供了一种新的有效成分，也为木蹄层孔菌胞外多糖的运用提供了一个新的方向。

技术领域

本发明涉及药剂技术领域，具体涉及一种木蹄层孔菌胞外多糖的应用。

背景技术

真菌多糖是真菌菌丝体在发酵过程中产生的多糖类次生代谢产物，广泛地存在于菌丝体、子实体及发酵液中，是一类能控制细胞分化、调节细胞生长和衰老的活性物质。目前相关研究主要集中于真菌多糖的分离提取、含量分析检测、物质结构解析、药理活性评估等领域。研究表明，活性多糖作为生物效应调节剂使用时，具有抗氧化、抗炎、免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、降血脂等多种生物活性。

木蹄层孔菌(Fomes fomentarius)为多孔菌目真菌，隶属于担子菌纲(Ba-sidiomycetes)、多孔菌目(Polyporales)、多孔菌科(Polyporaceae)、层孔菌属(Fomes)。据《本草纲目》记载，研究发现其子实体乙醇提取物对小鼠S-180瘤有很强的抑制作用，木蹄层孔菌具有抗氧化、抗炎、抗糖尿病活性等，但未有文章报道木蹄层孔菌多糖是否对小鼠烫伤皮肤具有好的活性。

发明内容

本发明人通过木蹄层孔菌胞外多糖对烫伤小鼠创面的愈合能力的实验发现：木蹄层孔菌胞外多糖可用于制备皮肤创面愈合剂，特别是可用于制备皮肤烫伤愈合剂；具体的：木蹄层孔菌胞外多糖可以有效的抑制创面的炎症反应、促进小鼠细胞因子的生成，加快组织修复与再生，对小鼠烫伤皮肤的愈合有很好的效果。

所述木蹄层孔菌胞外多糖通过以下方法制备所得：

将木蹄层孔菌子实体深层发酵后，采用纱布过滤，分别获得菌丝体和发酵液；发酵液经真空减压浓缩后，95％乙醇加入到浓缩后的发酵液中(3:1)，4℃冰箱静置过夜，获得沉淀即为粗多糖；

将粗多糖用蒸馏水水洗三次后，进行脱蛋白、30％H₂O₂脱色处理，然后将完成脱色脱蛋白后的多糖溶液透析，截留量为8000-14,000Da，透析时间：自来水24h，蒸馏水24h，冷冻干燥，获得初级纯化的木蹄层孔菌胞外多糖。FFEP经两根DEAE-52层析柱串联洗脱，对初级纯化多糖再进行纯化，精确配置1.0mg/mL多糖溶液，均匀添加于DEAE-52层析柱中(1.6cm×50cm，填充高度25cm)。以流速为0.5mL/min的双蒸水洗脱样品，洗脱液经浓缩、冷冻干燥后获得一种淡黄色粉末，即为纯品多糖。

本发明为创面愈合药剂的制备提供了一种新的有效成分，也为木蹄层孔菌胞外多糖的运用提供了一个新的方向。

附图说明

图1为不同给药的各组小鼠创面皮肤切片；

图中：A.空白对照组，B.高剂量组，C.阳性对照组D.未烫伤健康小鼠；×40(字母后数字代表天数)。

图2为不同给药的各组小鼠创面TGF-β含量的变化。

图3为不同给药的各组小鼠创面IL-6含量的变化。

图4为不同给药的各组小鼠创面MMP-1含量的变化。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进。这些都属于本发明的保护范围。

实施例