[发明专利]一种用于检测游离脂肪酸的试剂盒

说明书

本发明涉及体外诊断领域，具体涉及一种用于检测游离脂肪酸的试剂盒，包括试剂R1、试剂R2和校准品，试剂R1包括第一缓冲液、生物素标记的抗人NEFA抗体、FITC标记的抗人NEFA抗体、第一稳定剂、第一防腐剂、糖类化合物、第一表面活性剂；试剂R2包括第二缓冲液、链霉亲和素修饰胶乳微球、Anti‑FITC修饰胶乳微球、第二稳定剂、螯合剂、第二防腐剂、第二表面活性剂、增溶剂、促聚剂；校准品包括包括第三缓冲液、NEFA‑重组蛋白、第三稳定剂以及第三防腐剂。该试剂盒灵敏度高、准确度高、稳定性好。

技术领域

本发明涉及体外诊断领域，具体涉及一种用于检测游离脂肪酸的试剂盒。

背景技术

游离脂肪酸(NEFA)是存在于人体内的脂质，脂质大致可以分为胆固醇、中性脂肪(三酸甘油脂)、磷脂质等3种。游离脂肪酸是中性脂肪分解成的物质。主要与血清蛋白结合转运到全身组织利用，当肌肉活动所需能源--肝糖耗尽时，脂肪组织会分解中性脂肪成为游离脂肪酸来充当能源使用。所以，游离脂肪酸可说是进行持久活动所需的物质。

正常情况下，血浆中游离脂肪酸的含量极少，仅占总脂肪酸含量的5％～10％，游离脂肪酸在血浆中的半衰期2～3min，虽然游离脂肪酸只占身体脂肪很少的一部分，但却满足了能量需求的很大部分，游离脂肪酸有很强的细胞毒性，可损害细胞膜、线粒体和溶酶体膜等，引起细胞内微器损害，而且能增强细胞因子毒性。故而是监控人体脂代谢、糖代谢的重要指标。游离脂肪酸不仅能够反映人体脂肪代谢情况及血脂水平、评价血糖及辅助诊断糖尿病，还能反映人体内多种其他病理、生理情况，如胰岛素抵抗、肥胖、恶性疾病、代谢综合征和心血管疾病等。

目前临床上对人体血清游离脂肪酸的检测主要是通过游离脂肪酸检测试剂盒来检测，而市场上售卖的游离脂肪酸检测试剂盒通常使用的是酶法测定，一方面，酶法试剂盒成分比较复杂，试剂中含有多种酶，其试剂盒稳定性直接与酶活性相关，而酶的活性易受各种因素的干扰，比如pH、温度、紫外线、重金属盐、抑制剂、激活剂等，导致试剂盒缺乏稳定性，即使加入多种稳定剂，试剂的稳定剂仍然很差，保存时间短，影响临床使用。另一方面，酶法试剂盒灵敏度较低，为了加大试剂灵敏度往往会考虑加大酶的使用量，但是酶量加大会使试粘稠，剂产生沉淀，影响试剂的使用。因此研发一种稳定好、灵敏度高的游离脂肪酸测定试剂盒是游离脂肪酸测定领域亟需解决的一个问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：针对现有技术存在的不足，提供一种用于检测游离脂肪酸的试剂盒，该试剂盒灵敏度高、准确度高、稳定性好。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

一种用于检测游离脂肪酸的试剂盒，所述试剂盒包括：

试剂R1，所述试剂R1包括第一缓冲液、生物素标记的抗人NEFA抗体、FITC标记的抗人NEFA抗体、第一稳定剂、第一防腐剂、糖类化合物、第一表面活性剂；

试剂R2，所述试剂R2包括第二缓冲液、链霉亲和素修饰胶乳微球、Anti-FITC修饰胶乳微球、第二稳定剂、螯合剂、第二防腐剂、第二表面活性剂、增溶剂、促聚剂；

校准品，所述校准品包括包括第三缓冲液、NEFA-重组蛋白、第三稳定剂以及第三防腐剂。

作为一种改进的技术方案，所述生物素标记的抗人NEFA抗体的浓度为100-200μg/ml、所述FITC标记的抗人NEFA抗体的浓度为50-100μg/ml。

作为一种改进的技术方案，所述链霉亲和素(SA)修饰胶乳微球的浓度为0.07-0.5mg/L，所述Anti-FITC修饰胶乳微球的浓度为0.07-0.5mg/L。

作为一种改进的技术方案，所述第一缓冲液、第二缓冲液或第三缓冲液为磷酸盐缓冲液、TRIS缓冲液、Hepes缓冲液或Mes缓冲液；所述第一缓冲液、第二缓冲液或第三缓冲液的浓度为20-50mM。