[发明专利]高效降解氨基甲酸乙酯的菌株及其应用

权利要求书

1.一株高效降解氨基甲酸乙酯的根瘤土壤杆菌，其特征在于，菌株DL-DNH02 保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC，保藏编号：CGMCC No.21309。

2.一种权利要求1所述菌株DL-DNH02在降解氨基甲酸乙酯中的应用。

3.根据权利要求2所述菌株DL-DNH02在降解氨基甲酸乙酯中的应用，其特征在于，所述菌株DL-DNH02在降解氨基甲酸乙酯中的应用还包括在发酵食品中降解氨基甲酸乙酯。

4.根据权利要求3所述菌株DL-DNH02 在降解氨基甲酸乙酯中的应用，其特征在于，所述在发酵食品中降解氨基甲酸乙酯的应用包括在白酒中降解氨基甲酸乙酯；所述在白酒中降解氨基甲酸乙酯的过程包括将所述菌株DL-DNH02接种至白酒中，以30℃、100rpm的条件温育5天降解白酒中的氨基甲酸乙酯。

5.根据权利要求2所述菌株DL-DNH02在降解氨基甲酸乙酯中的应用，其特征在于，所述菌株DL-DNH02在降解氨基甲酸乙酯中的应用还包括所述菌株DL-DNH02的发酵产物在降解氨基甲酸乙酯中的应用，所述发酵产物包括所述菌株DL-DNH02的含菌发酵液、发酵液上清、菌体悬浮液和细胞裂解液。

6.一种权利要求1所述菌株DL-DNH02用于氨基甲酸乙酯降解剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、将活化后的菌株DL-DNH02培养液以10%接种量接种于营养肉汤培养基进行培养，在30℃、180rpm 恒温振荡培养24 h，获得种子液；

S2、将S1步骤所述种子液按1：10比例接种于装有发酵培养基的生产发酵罐，通气量0.6m³/min，搅拌速率180rpm，30℃条件下培养48h；发酵结束后获得菌体数量≥1.0×10⁹ CFU/mL的发酵液；

S3、含菌发酵液微胶囊的制备：收集 S2 步骤所述发酵液，经冷冻真空干燥后，利用去离子水回调体积至原体积的1/20，制得所述DL-DNH02含菌发酵液，经海藻酸钠包埋后制成所述含菌发酵液微胶囊；

S4、发酵液上清微胶囊的制备：离心 S3 所述 DL-DNH02 含菌发酵液并收集DL-DNH02茵体沉淀物和DL-DNH02发酵液上清；所述DL-DNH02发酵液上清经冷冻真空干燥，利用去离子水回调体积至其原体积的 1/20，得到所述DL-DNH02发酵液上清，经海藻酸钠包埋后制成所述发酵液上清微胶囊；

S5、菌体悬浮液微胶囊的制备：稀释S4步骤所述DL-DNH02菌体沉淀物，得到浓度20 OD的所述DL-DNH02菌体悬浮液，经海藻酸钠包埋后制成所述菌体悬浮液微胶囊；

S6、细胞裂解液微胶囊的制备：取S5步骤所述菌株DL-DNH02菌体悬液经过细胞破壁得到所述DL-DNH02细胞裂解液，经海藻酸钠包埋后制成所述细胞裂解液微胶囊。