[发明专利]一种提高反硝化型厌氧甲烷氧化微生物活性的方法

权利要求书

1.一种提高反硝化型厌氧甲烷氧化微生物活性的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)以利用硝酸盐氮为唯一电子受体、甲烷为唯一电子供体，从湖泊水体中富集驯化厌氧甲烷氧化混合菌群；

(2)往含有硝酸盐的矿物盐培养基中添加胡敏素，然后接入步骤(1)富集驯化得到的厌氧甲烷氧化混合菌群，培养后，厌氧甲烷氧化微生物的反硝化活性得到提高。

2.如权利要求1所述提高反硝化型厌氧甲烷氧化微生物活性的方法，其特征在于，步骤(1)中，从湖泊水体中富集驯化厌氧甲烷氧化混合菌群的方法，包括如下步骤：

1)取20mL湖泊水和20mL含有硝酸盐的矿物盐培养基加入到厌氧血清瓶中，用氮气置换血清瓶中液体和顶空气体各15分钟后，将血清瓶盖盖密封；

2)用无菌注射器向血清瓶的顶空中加入甲烷气体，使甲烷气体的体积分数为10％，混合均匀；

3)将厌氧血清瓶倒置放在25-30℃培养箱中培养；

4)定期测试培养体系中硝酸根离子和亚硝酸根离子的浓度，待培养体系中硝酸氮完全去除后，按照10％的体积比传代培养混合菌群，直到获得活性稳定的厌氧甲烷氧化混合菌群。

3.如权利要求1所述提高反硝化型厌氧甲烷氧化微生物活性的方法，其特征在于，步骤(2)中，含有硝酸盐的矿物盐培养基的组成为：0.17g/LNaNO₃,0.006g/L EDTA,1.25g/LNaHCO₃，0.05g/L NaH₂PO₄,0.05g/L Na₂HPO₄，0.2g/LMgSO₄·7H₂O,0.3g/L CaCl₂·2H₂O,0.006g/L FeSO₄·7H₂O和0.5mL/L的微量元素溶液。

4.如权利要求3所述提高反硝化型厌氧甲烷氧化微生物活性的方法，其特征在于，所述微量元素溶液的组成为：0.43g/L ZnSO₄·7H₂O,0.90g/L MnCl₂·4H₂O,0.24g/L CoCl₂·6H₂O，0.20g/L NiCl₂·6H₂O,0.01g/L H₃BO₃，0.25g/L CuSO₄·5H₂O,0.20g/L(NH₄)₆Mo₇O₂₄·4H₂O,0.05g/L SeO₂。

5.如权利要求1或2或3或4所述提高反硝化型厌氧甲烷氧化微生物活性的方法，其特征在于，每30-50mL含有硝酸盐的矿物盐培养基中添加0.5g胡敏素。