[发明专利]丙氨酰谷氨酰胺高温降解杂质及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种丙氨酰谷氨酰胺高温降解杂质及其制备方法和应用，取丙氨酰谷氨酰胺溶于纯净水中，90‑100℃水浴加热反应，反应液用制备液相色谱分离纯化得到产品。本发明提供了L‑丙氨酰‑L‑谷氨酰胺的另一个新的高温降解杂质，纯度高，可作为有关物质检测用对照品，用于L‑丙氨酰‑L‑谷氨酰胺及其复方其制剂的质量控制及毒理学评价。

技术领域

本发明涉及一种丙氨酰谷氨酰胺高温降解杂质及其制备方法和应用，属于杂质化合物领域。

背景技术

L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(Ala-Gln)是一种重要的肠外营养产品，在体内可代谢为L-丙氨酸和L-谷氨酰胺。该产品作为注射液和冻干粉产品收入我国药典，临床上用于氮平衡和蛋白质合成，维持肠道粘膜完整性等。

L-丙氨酰-L-谷氨酰胺为二肽，在高温条件下容易发生降解，降解产物较复杂。文献(Journal of Chromatography A,1259(2012)111–120；European Journal ofPharmaceutical Sciences,7(1998)107–112)报道了Ala-Gln的降解途径，提出了7个相关杂质的结构cyclo(AlaGlu)，cyclo(AlaGln)，PyroGluAla，pyroGlu，Glu(Ala)，GluAla，AlaGlu，AlaGlu(AlaGln)。

发明内容

本发明的第一目的在于提供另一种丙氨酰谷氨酰胺高温降解杂质，本发明的第二目的在于提供其应用，第三目的在于提供其制备方法。

为了实现本发明的上述第一目的，本发明提供了一种丙氨酰谷氨酰胺高温降解杂质，其结构式为：

所述丙氨酰谷氨酰胺高温降解杂质在丙氨酰谷氨酰胺质量控制中的应用。

本发明的第三目的是这样实现的：一种所述丙氨酰谷氨酰胺高温降解杂质的制备方法，其特征在于，按照如下步骤制备：取丙氨酰谷氨酰胺溶于纯净水中，置于90-100℃水浴中加热反应，反应液用制备液相色谱分离纯化得到产品。

上述方案中，制备液相色谱分离纯化条件为：制备色谱柱采用COSMOSIL5C18-MS-II，5C18-PAQ，2.0×25cm，流动相为0.05％TFA(三氟乙酸)水溶液等度洗脱，流速为10ml/min。

通过长期研究，本发明提供了L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的另一个新的高温降解杂质，纯度高，可作为有关物质检测用对照品，用于L-丙氨酰-L-谷氨酰胺及其复方其制剂的质量控制及毒理学评价。

附图说明：

图1为杂质1的ESIMS+图

图2为杂质1的ESIMS-图。

图3为杂质1的MSMS图。

图4为杂质1的1H-NMR图。

具体实施方式：

下面结合实施例对本发明作进一步详细说明。

实施例1 L-丙氨酰-L-谷氨酰胺高温降解

取L-丙氨酰-L-谷氨酰胺1g溶于10ml纯净水中，置于90℃-100℃水中反应1小时，反应液直接用制备液相色谱分离纯化。

实施例2降解杂质的分离纯化

高温降解液用制备液相色谱，使用制备色谱柱(COSMOSIL 5C18-MS-II，5C18-PAQ，2.0×25cm)，流动相为0.05％TFA水溶液等度洗脱，流速为10ml/min，分离得到分离得Fr4溶液。