[发明专利]模拟多种HFRS疾病特征的动物模型的构建方法及其用途

说明书

本发明涉及一种动物模型的构建方法，特别涉及模拟多种HFRS疾病特征的动物模型的构建方法及用途。所述方法是将HTNV 76‑118病毒腹腔注射感染NLRC3KO小鼠，感染剂量为5×10⁵PFUs/50μL/只；所述疾病特征表现为：该模型小鼠肾脏肾小管弥漫性扩张，肾髓质毛细血管出血；脾脏中出现大量髓外造血灶，肝脏中肝细胞水肿、变性、坏死；血小板数量下降，白细胞数量减少，同时伴有肝肾功能损伤。本发明构建的动物模型可用于HFRS疾病药物的筛选和疗效评价。

技术领域

本发明涉及一种动物模型的构建方法，特别涉及模拟多种HFRS疾病特征的动物模型的构建方法及其用途。

背景技术

汉坦病毒(Hantavirus)隶属于布尼亚病毒目汉坦病毒科的正汉坦病毒属，是一种有胞膜的单负链RNA病毒，其基因组由3个片段组成，其中大(L)片段编码病毒RNA依赖的RNA聚合酶(RNA-depended RNA polymerase)，中(M)片段编码病毒包膜糖蛋白(glycoproteins，Gn and Gc)，小(S)片段编码病毒核蛋白(nucleoprotein,NP)。人类主要通过接触其自然宿主(啮齿类动物)的排泄物或直接被咬伤而感染汉坦病毒，主要引起两种严重的疾病，分别为肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)和汉坦病毒心肺综合征(hantavirus cardiopulmonary syndrome,HPS)。HFRS是一种以发热、出血、急性肾功能损伤为主要特征的自然疫源性疾病。

HTNV感染其自然宿主并不出现明显的临床症状，而是处于持续带毒的状态这导致目前尚缺乏HTNV感染的疾病动物模型，从而制约了临床治疗药物以及HTNV疫苗评价体系的建立。理想的病毒性疾病动物模型是研究病毒在宿主体内的入侵、复制、传播、致病、转归等机理，并为临床治疗药物以及疫苗评价提供重要工具。虽然，50年代就明确新生乳鼠接种HTNV后能够引起致死性疾病，但其主要引发小鼠神经系统病变，与HFRS疾病特点不一致，因此具有限制性。此外，前期文献报道的SCID小鼠可作为一种HTNV感染动物的评价体系，是基于病毒感染后小鼠肝、脾、肺中能够检测到高水平的病毒特异性抗原，同时肝、脾肺组织中出现了明显的病理变化，而心、脑、肾组织中均未见明显的病理学变化但是，该SCID小鼠模型并不能很好的模拟HFRS主要疾病特征：急性肾功能损伤和血小板减少，具有一定的限制性。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供了一种模拟多种HFRS疾病特征的动物模型的构建方法及用途，该动物模型所诱导产生的病理性改变能够模拟典型HFRS疾病的临床特征，更加符合HTNV对人类的自然感染过程。

为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：

本发明的第一个方面是提供模拟多种HFRS疾病特征的动物模型的构建方法，将HTNV毒注射感染小鼠，感染剂量为4.98×10⁵-5.02×10⁵PFUs/50μL/30g；

所述疾病特征表现为：该模型小鼠肾脏肾小管弥漫性扩张，肾髓质毛细血管出血；脾脏中出现大量髓外造血灶，肝脏中肝细胞水肿、变性、坏死；血小板数量下降，白细胞数量减少，同时伴有肝肾功能损伤。

进一步的，所述注射为腹腔注射。

进一步的，所述小鼠为NLRC3 KO小鼠。

本发明的第二个方面是提供一种非诊断和非治疗性的根据所述方法构建的动物模型的用途，该用途具体是用于筛选或鉴定治疗或缓解多种HFRS疾病的物质其中，所述HFRS临床疾病特征表现为：肾脏肾小管弥漫性扩张，肾髓质毛细血管出血；脾脏中出现大量髓外造血灶，肝脏中肝细胞水肿、变性、坏死；血小板数量下降，白细胞数量减少，同时伴有肝肾功能损伤。

本发明的第三个目的是提供一种非诊断和非治疗性的，筛选或鉴定治疗多种HFRS疾病的潜在治疗剂的方法，包括以下步骤：