[发明专利]Thbs1及其抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用

说明书

本发明涉及生物医药领域，公开了Thbs1及其抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明提供了一种以Thbs1为靶点，激活机体免疫发挥抗肿瘤作用的治疗策略。实验证明，通过抑制Thbs1在肿瘤部位的表达，可以促进机体免疫，有效抑制肿瘤生长。通过联合使用Thbs1抑制剂和免疫检查点抑制剂，可以抑制Thbs1蛋白的分泌，从而强化化学免疫治疗，有效抑制肿瘤生长。因此，本发明公开Thbs1抑制剂可以作为抗肿瘤药物，且可以发挥激活肿瘤免疫治疗的作用，具有重要的应用价值。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，尤其涉及以血小板反应蛋白(Thrombospondin-1，Thbs1)为靶点的药物、抑制剂和治疗方法，及其在抗肿瘤治疗领域内的应用。

背景技术

据2019年美国癌症协会的最新报道显示，在过去的十年中，美国女性癌症的发病率稳定，男性的癌症发病率每年下降约2％，而癌症死亡率(2007-2016年)每年分别下降1.4％和1.8％，这一切无疑归功于各类抗肿瘤疗法的开发和进步。在中国，2018年中国新增癌症病例430万例，新增癌症死亡290万例。与美国和英国相比，中国的癌症发病率较低，但癌症死亡率比英国和美国高30％和40％。并且，由于经济差距导致的可预防性癌症在贫富人群中的差异依然显著。因此，积极开发有效的癌症预防、早期发现和治疗策略，无疑将加速防止癌症的进展，降低癌症的死亡率、延长患者生存期。

近年来，临床上取得突破性进展的抗肿瘤疗法当属免疫疗法的应用，包括免疫检查点抑制剂、CAR-T疗法等。但是，其个体差异性、炎症和自身免疫不良反应等限制了免疫疗法的临床应用。因此，寻找新的药物作用靶点和新的抗肿瘤治疗方式依然十分迫切。虽然，诸多临床前研究和发现报道的Thbs1的通过抗血管生成实现抗肿瘤效果，但是尚未发现通过抑制Thbs1的表达，实现免疫治疗肿瘤的报道。总而言之，针对Thbs1的抗肿瘤研究较少，尚未成熟。以Thbs1为靶点的药物和抑制剂未见公开，针对Thbs1蛋白的药物和产品极具发展前景。

发明内容

发明目的

本发明的目的是开发一种基于Thbs1蛋白的抗肿瘤策略，扩展肿瘤治疗的手段和方式。本发明证明能下调Thbs1的药物和抑制剂等可以有效延长小鼠生存期，促进抗肿瘤免疫等。

技术方案

Thbs1及其抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于通过抑制Thbs1蛋白的活性实现抗肿瘤活性。

所述的应用，其特征在于通过敲减或敲除肿瘤部位Thbs1的表达和分泌、抑制Thbs1基因的功能实现抗肿瘤活性。

所述的应用，其特征在于以Thbs1蛋白为靶点的抑制剂，包括透明质酸-冬凌草甲素前药、冬凌草甲素、HNPs、以及干扰RNA序列。

所述的干扰RNA序列包括siRNA和shRNA；

注shRNA是根据siRNA设计而成，一般先合成设计siRNA。

siRNA1序列：GCTGGAAAGATTTCACTGCAT

shRNA1序列如下：

Top strand:

TCGAGGCTGGAAAGATTTCACTGCATTTCAAGAGAATGCAGTGAAATCTTTCCAGCTTTTTTA

Bottom strand:

AGCTTAAAAAAGCTGGAAAGATTTCACTGCATTCTCTTGAAATGCAGTGAAATCTTTCCAGCC

siRNA2序列：GCGCCTATTTACTTCCCACTA

siRNA2序列：

Top strand: