[发明专利]靶向Smo蛋白的Hedgehog信号通路抑制剂及制备方法和用途

说明书

本发明提供了一类靶向Smo蛋白的Hedgehog(Hh)信号通路抑制剂及其制备方法和用途，本发明通过浸提、溶剂分配、色谱柱分离和HPLC纯化等系列流程制备得到3个新型靶向Smo蛋白的Hedgehog信号通路抑制剂。这3个天然生物碱化合物在Shh‑lightⅡ细胞中表现出显著的Hedgehog信号通路抑制活性，并在与荧光环巴胺竞争性结合Smo的实验中表现出明显的竞争活性，表明是它们是靶向Smo蛋白从而抑制Hh信号通路。以此类化合物为先导化合物，进行结构优化，可为治疗Hedgehog信号通路异常激活相关疾病特别是Smo抑制剂的新药研发提供候选药物，将具有重要的现实意义。这一类靶向Smo蛋白的Hedgehog信号通路抑制剂化合物1‑3的结构式如下：

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及一类靶向Smo蛋白的Hedgehog信号通路抑制剂及制备方法，以及其在制备治疗Hedgehog信号通路相关疾病药物中的应用。

背景技术

Hedgehog(Hh)信号通路在胚胎发育、组织生长和分化等多种生理过程中起关键作用，并与多种人类肿瘤的发生和发展密切相关，如胰腺癌、结肠癌、乳腺癌、胃癌以及儿童常见脑部疾病髓母细胞瘤(medulloblastoma，MB)等。Hh信号通路主要由Shh配体蛋白、12次跨膜蛋白Patched(Ptch)、跨膜信号转导蛋白Smoothened(Smo)以及核转录因子Glioma-associated oncogene(Gli)等组成。当Hh配体与Ptch1结合，Ptch1解除对Smo蛋白的抑制，Smo蛋白被磷酸化激活并转运至初级纤毛，Gli释放促使GliA入核，从而激活靶基因的转录和表达；反之，在没有Hh配体存在时，Ptch抑制Smo蛋白的纤毛转移，促使Gli被磷酸化后变成阻遏子GliR，进入核内从而阻断靶基因的转录。由此可见，Hh信号通路小分子抑制剂的发现为治疗Hh信号通路异常激活相关疾病提供一条切实可行的策略。

藜芦属植物在抗肿瘤、保护肝脏等方面均有良好的药理作用。迄今为止，从藜芦属中分离所得的100多种结构多样性的生物碱，大多为胆甾烷生物碱，主要包括五种结构类型：cevanine、veratramine(藜芦胺)、jervanine(介芬胺)、solanidine(龙葵胺)和verazine型，其中，jervanine型代表性生物碱cyclopamine(环巴胺)(IC₅₀＝300nM)和jervine(IC₅₀＝80nM)是重要的Hh信号通路抑制剂。研究表明它们主要作用于Smo蛋白的7TM区域而抑制下游信号传导通路。但是，由于酸不稳定性和生物利用度低，限制了该类生物碱的应用。Vismodegib与Sonidegib为FDA批准上市(2012和2015年)的2个靶向Smo蛋白的Hedgehog通路抑制剂，但随之出现的副作用及突变引发的耐药给患者带来严重影响。因此，在不同属的藜芦中寻找新的具有靶向Smo蛋白的Hh信号通路抑制活性且作用靶点的新型化合物变得极其重要。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供了一类靶向Smo蛋白的Hedgehog信号通路抑制剂及制备方法，以及其在制备治疗Hedgehog信号通路相关疾病药物中的应用。

本发明首先提供了一类靶向Smo蛋白的Hedgehog信号通路抑制剂，所述化合物具有如下式1-3任一所述的结构：

本发明还提供了所述靶向Smo蛋白的Hedgehog信号通路抑制剂的制备方法，其是从毛叶藜芦中提取一类靶向Smo蛋白的Hedgehog信号通路抑制剂的方法，通过以下技术方案实现：

(1)将毛叶藜芦的全株粉碎，经提取溶剂提取得到提取物；提取物通过氧化铝柱层析分离，以醇水洗脱体系洗脱，薄层色谱检测，得到含生物碱粗组分；含生物碱粗组分进行乙酸乙酯和水溶剂分配，得乙酸乙酯层萃取物；