[发明专利]一种酿酒酵母表达长效重组人丝聚蛋白及其应用有效
| 申请号： | 202110357115.6 | 申请日： | 2021-04-01 |
| 公开（公告）号： | CN113045638B | 公开（公告）日： | 2022-04-15 |
| 发明（设计）人： | 赵俊;刘洁;刘家炉;凡玉芳;孔国庆;周炜;何志远 | 申请（专利权）人： | 芜湖英特菲尔生物制品产业研究院有限公司;安徽普若汀生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/47 | 分类号： | C07K14/47;C12N15/12;C12N15/81;C12N1/19;A61K8/64;A61Q19/00;C12R1/865 |
| 代理公司： | 合肥市泽信专利代理事务所(普通合伙) 34144 | 代理人： | 方荣肖 |
| 地址： | 241100 安徽省芜湖市芜湖经济技术*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 酿酒 酵母 表达 长效 重组 人丝聚 蛋白 及其 应用 | ||
1.一种酿酒酵母表达的长效重组人丝聚蛋白，其特征在于：所述长效重组人丝聚蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.如权利要求1所述的酿酒酵母表达的长效重组人丝聚蛋白，其特征在于，所述长效重组人丝聚蛋白的核苷酸序列所对应的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.如权利要求2所述的酿酒酵母表达的长效重组人丝聚蛋白，其特征在于，所述长效重组人丝聚蛋白的氨基酸序列包括丝聚蛋白的氨基酸序列及人血清白蛋白的氨基酸序列；所述丝聚蛋白的氨基酸序列包括丝聚蛋白核苷酸序列重复单元C端的一个单体结构所对应的氨基酸序列。
4.一种酿酒酵母信号肽重组质粒，其特征在于，其采用如权利要求1-2中任意一项所述的酿酒酵母表达的长效重组人丝聚蛋白的基因。
5.如权利要求4所述的酿酒酵母信号肽重组质粒，其特征在于，所述酿酒酵母信号肽重组质粒的构建包括以下操作步骤：
根据酿酒酵母Mfα基因的序列设计合成引物，所述合成引物包括正向引物Mfα-F及反向引物Mfα-R；
通过RT-PCR扩增酵母中信号肽Mfɑ基因，获得RT-PCR扩增产物后，胶回收所述RT-PCR扩增产物，获得胶回收产物；
对所述胶回收产物及空质粒pYES2/CT进行双酶切，再进行胶回收，获得分泌信号肽片段Mfα及载体片段pYES2/CT；
连接所述分泌信号肽片段Mfα及所述载体片段pYES2/CT。
6.如权利要求4所述的酿酒酵母信号肽重组质粒，其特征在于，所述正向引物Mfα-F如Seq ID NO.3所示，所述反向引物Mfα-R如Seq ID NO.4所示。
7.一种酿酒酵母分泌表达载体，其特征在于，其含有如权利要求1-2中任意一项所述的酿酒酵母表达的长效重组人丝聚蛋白的基因。
8.一种酿酒酵母营养缺陷型菌株，其特征在于，所述酿酒酵母营养缺陷型菌株含有如权利要求1-2中任意一项所述的酿酒酵母表达的长效重组人丝聚蛋白的基因。
9.如权利要求8所述的酿酒酵母营养缺陷型菌株，其特征在于，所述酿酒酵母营养缺陷型菌株的制备及转化包括以下步骤：
步骤一：酿酒酵母表达体系常用溶液及培养基的配制；
步骤二：含所述酿酒酵母表达的长效重组人丝聚蛋白基因的重组质粒转化酿酒酵母。
10.一种酿酒酵母表达的长效重组人丝聚蛋白在保湿化妆品中的应用，其特征在于，其采用如权利要求1-2中任意一项所述的酿酒酵母表达的长效重组人丝聚蛋白。
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