[发明专利]一种秸秆制备黄腐酸的方法

权利要求书

1.一种秸秆制备黄腐酸的方法，其特征在于包括：

（1）菌种活化：将菌种分别接种于YPD平板培养基上30℃培养活化；

（2）一级种子培养：按照豆粕水解液（300-400）g/L、玉米粉（4-8）g/L、蔗糖（1.0-1.5）g/L、NaCl 15g/L、MgSO₄·7H₂O 8g/L、KH₂PO₄ 6g/L、(NH₄)₂HPO₄ 4.5g/L，配制一级种子培养基，自然pH值，将活化菌种接种于1000mL的液体培养基中在30℃，200rpm下发酵24h；

（3）二级种子培养：

按照豆粕水解液（300-400）g/L、玉米粉（1-5）g/L、蔗糖（0.5-1）g/L、NaCl 10g/L、MgSO₄·7H₂O 4g/L、KH₂PO₄ 3g/L、(NH₄)₂HPO₄ 2g/L，配制二级种子液，自然pH值，按照2％的接种量将枯草芽孢杆菌、热带假丝酵母和黑曲霉的二级种子液接种到10L的二级种子液罐中，发酵6-8h，得相应的发酵种子液Ⅰ；

按照豆粕水解液（300-400）g/L、玉米粉（1-5）g/L、蔗糖（0.5-1）g/L、NaCl10g/L、MgSO₄·7H₂O 4g/L、KH₂PO₄ 3g/L、(NH₄)₂HPO₄ 2g/L，配制二级种子液，自然pH值，按照2％的接种量将枯草芽孢杆菌和白腐真菌的二级种子液接种到10L的二级种子液罐中，发酵6-8h，得相应的发酵种子液Ⅱ；

（4）扩大发酵：

秸杆前处理后软化好的秸秆，按照秸秆:制浆黑液为1:5添加制浆黑液，并添加H₃PO₄，调PH至4-5，按照豆粕水解液（300-400）g/L、NaCl 10g/L、MgSO₄·7H₂O 4g/L，配制成发酵液，按照2-4％的接种量将发酵种子液Ⅰ接种到100L的发酵液罐中，发酵过程中添加辅料Ⅰ，发酵6-8小时；

并再按照2-4％的接种量将发酵种子液Ⅱ接种到100L的发酵液罐中，且并在发酵过程中添加辅料Ⅱ，发酵16-24小时停止发酵；所述秸杆前处理：机械破碎稻草至变软，按照1:2将秸秆浸泡于制浆黑液中，24～48h后捞出，软化好的秸秆质地柔软；

(5)黄腐酸的提取：在步骤(4)中的发酵液，经充分发酵后的固液混合物，板框挤压过滤得到的悬浮液体，通过0.1-0.2mol/L 碱液溶解抽提分离，用HCI调至pH值为1.8-2.2，静置1-3h，过滤，分离，上清液即为黄腐酸溶液；利用喷雾干燥机干燥后即得到黄腐酸干粉；

所述的辅料Ⅰ包括辅酶Q，所述的辅料Ⅱ包括辅酶Q、葡聚糖酶和壳聚糖，

所述的发酵种子液Ⅰ的枯草芽孢杆菌、热带假丝酵母和黑曲霉的接种量之比为4-6：6-7：5-6；

所述的发酵种子液Ⅱ的枯草芽孢杆菌和白腐真菌的接种量之比为1-2：6-8。