[发明专利]胚胎干细胞外泌体在制备美白及抗衰老药物或者化妆品中的用途

权利要求书

1.胚胎干细胞外泌体和多肽在制备美白和抗衰老的药物中的用途；其中，胚胎干细胞外泌体分离自商用的胚胎干细胞细胞系，所述多肽为SEQ ID NO：1所示的多肽；其中，所述外泌体的制备方法如下：将胚胎干细胞H9在mTeSR1人ES/iPS细胞无饲养层完全培养基中在37℃、5％CO₂低氧培养箱中培养；等到细胞已长满即可进行传代，具体步骤如下：弃去培养液，用PBS洗涤1-2次，加入1.0ml胰酶消化液，37℃消化，加入双倍的含10％血清的人ES/iPS细胞无饲养层完全培养基，终止消化并轻轻吹打细胞，使其变成单细胞悬液，将细胞收集于离心管中离心1000rpm/5min，弃上清，轻弹管底，将细胞弹散，加入新鲜的含10％血清和100ng/mL IFN-γ的人ES/iPS细胞无饲养层完全培养基，重悬细胞，进行传代培养，传代比例为1:2，传代连续培养16h后收集上清；将细胞培养上清转移至50mL离心管，300g离心10分钟；留取上清，2000g离心15分钟；留存上清，10000g离心30分钟；将上清转移至超速离心管中，并用天平配平，100000g离心70分钟；弃上清，用经0.22μm滤器滤过的PBS重悬，并用天平配平，100000g离心70分钟；弃上清，用PBS重悬外泌体；外泌体采用超滤离心管浓缩，即可得到外泌体。

2.胚胎干细胞外泌体和多肽在制备美白和抗衰老的化妆品中的用途；其中，胚胎干细胞外泌体分离自商用的胚胎干细胞细胞系，所述多肽为SEQ ID NO：1所示的多肽；其中，所述外泌体的制备方法如下：将胚胎干细胞H9在mTeSR1人ES/iPS细胞无饲养层完全培养基中在37℃、5％CO₂低氧培养箱中培养；等到细胞已长满即可进行传代，具体步骤如下：弃去培养液，用PBS洗涤1-2次，加入1.0ml胰酶消化液，37℃消化，加入双倍的含10％血清的人ES/iPS细胞无饲养层完全培养基，终止消化并轻轻吹打细胞，使其变成单细胞悬液，将细胞收集于离心管中离心1000rpm/5min，弃上清，轻弹管底，将细胞弹散，加入新鲜的含10％血清和100ng/mL IFN-γ的人ES/iPS细胞无饲养层完全培养基，重悬细胞，进行传代培养，传代比例为1:2，传代连续培养16h后收集上清；将细胞培养上清转移至50mL离心管，300g离心10分钟；留取上清，2000g离心15分钟；留存上清，10000g离心30分钟；将上清转移至超速离心管中，并用天平配平，100000g离心70分钟；弃上清，用经0.22μm滤器滤过的PBS重悬，并用天平配平，100000g离心70分钟；弃上清，用PBS重悬外泌体；外泌体采用超滤离心管浓缩，即可的到外泌体。

3.如权利要求1或2所述的用途，其特征在于所述药物或者化妆品中还含有抗氧化剂。

4.如权利要求1或2所述的用途，其特征在于所述药物或者化妆品中还含有抗自由基抗氧化剂。

5.如权利要求2所述的用途，其特征在于所述化妆品为乳液形式。