[发明专利]一种人工设计抗菌肽的制备及其在水产上的应用

说明书

本发明提供了一种基于已有模板抗菌肽序列Ala Pro Lys Ala Met Lys Leu Leu Lys Lys Leu Leu Lys Leu Gln Lys Lys Gly Ile（NCBI数据库收录号：AJN45154）设计合成的新抗菌肽JSKJ01，本发明同时提供人工设计合成抗菌肽JSKJ01的制备方法，本发明还提供抗菌肽JSKJ01的应用方法；人工设计合成抗菌肽JSKJ01具有显著的抑制细菌以及真菌生长的作用，尤其是对耐药细菌有很好的抑制作用；与设计模板比较，在保留模板抗菌活性的同时，针对部分细菌菌株新设计抗菌肽JSKJ01的活性优于设计模板；人工设计合成抗菌肽JSKJ01具有结构简单、人工合成方便、抗菌谱系广的有益特点；其显著特点在于无药物残留，对多种水产细菌性病害的预防和治疗效果显著；可以应用于人或动物感染性疾病的预防和治疗，特别是在水产上的应用。

技术领域

本发明提供了一个人工设计合成的抗菌肽（JSKJ01），本发明还涉及抗菌肽（JSKJ01）的制备及其在水产上的应用，属生物医学领域。

背景技术

抗菌肽是存在于生物体内能抵抗外界微生物侵害的一类小分子多肽，它是先天免疫系统的重要组成部分。抗菌肽通常由l5～45个氨基酸残基组成，大部分带正电荷。抗菌肽广泛地分布在两栖类、昆虫、植物和哺乳动物中。绝大多数抗菌肽分子含有较多的碱性氨基酸残基，因此又被称为阳离子抗菌肽。抗菌肽具有广谱抗微生物活性，对革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌、真菌和被膜病毒都有抑杀作用，特别对一些耐药菌，如伤寒杆菌、金黄色葡萄球菌等同样敏感。其作用机制主要是带正电的抗菌肽与带负电的微生物细胞膜发生作用，按作用特点可分为膜结构破坏型和非膜结构破坏型。与目前广泛使用的抗生素相比，肽类抗生素具有很多优点：如在最小作用浓度时，快速而广谱的杀灭微生物活性；不易产生耐药性；热稳定、水溶性好；对局部感染和全身感染都有效等。

长期以来，抗生素在治疗畜禽水产养殖动物病害时见效快、疗效显著，成为畜禽水产养殖领域治疗细菌性疾病的首选药物。然而，随着抗生素在畜禽水产养殖领域应用规模的不断扩大，人们发现，常用抗生素的治疗效果逐渐减弱，与之对应的是，病原菌耐药性不断增强，导致抗生素的单位用药量不断加大，抗生素在畜禽水产品中的残留问题也愈发严重，威胁食品安全，抗生素在环境中的广泛残留也威胁着人类健康。由于抗生素耐药性和残留问题的日益突出，2018年6月，农业农村部公布2018年全国兽用抗菌药使用减量化行动试点工作方案（2018～2021），即到2021年饲料中禁止添加抗生素。抗生素的危害日趋显现，抗生素替代品的发展与应用势在必行，抗菌肽作为一种抗生素的替代物备受关注，加强对抗菌肽功能的了解，并在此基础上设计新型的抗菌肽以替代抗生素有着重要的理论和实际意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种基于已有模板抗菌肽序列Ala Pro Lys Ala Met LysLeu Leu Lys Lys Leu Leu Lys Leu Gln Lys Lys Gly Ile（NCBI数据库收录号：AJN45154）设计合成的新抗菌肽JSKJ01，本发明同时提供人工设计合成抗菌肽JSKJ01的制备方法，本发明还提供抗菌肽JSKJ01的应用方法。人工设计合成抗菌肽JSKJ01具有显著的抑制细菌以及真菌生长的作用，尤其是对耐药细菌有很好的抑制作用。与设计模板比较，在保留模板抗菌活性的同时，针对部分细菌菌株新设计抗菌肽JSKJ01的活性优于设计模板。人工设计合成抗菌肽JSKJ01具有结构简单、人工合成方便、抗菌谱系广的有益特点。可以应用于人或动物感染性疾病的预防和治疗，特别是在水产上的应用。

为了实现本发明的目的，本发明提供了如下技术方案：

人工设计合成抗菌肽JSKJ01，所述抗菌肽具有以下序列：

SEQ ID NO:1：丙氨酸－赖氨酸－赖氨酸－丙氨酸－甲硫氨酸－赖氨酸－苯丙氨酸－苯丙氨酸－赖氨酸－赖氨酸－苯丙氨酸－苯丙氨酸－赖氨酸－亮氨酸－缬氨酸－赖氨酸－赖氨酸－甘氨酸－异亮氨酸 (Ala Lys Lys Ala Met Lys Phe Phe Lys Lys PhePhe Lys Leu Val Lys Lys Gly Ile)