[发明专利]一种SARS-CoV-2抗体的检测方法有效
申请号: | 202110366253.0 | 申请日: | 2021-04-06 |
公开(公告)号: | CN113092414B | 公开(公告)日: | 2023-03-10 |
发明(设计)人: | 龙峰;徐文娟;宋丹;刘佳瑶 | 申请(专利权)人: | 中国人民大学 |
主分类号: | G01N21/41 | 分类号: | G01N21/41;G01N33/569;G01N33/543 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 赵静 |
地址: | 100872 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 sars cov 抗体 检测 方法 | ||
1.一种功能化光纤探针的制备方法,包括下述步骤:
a)采用多模光纤作为检测探针,去除光纤表面涂覆层,将光纤两端磨平并抛光;
b)将光纤端面置于食人鱼溶液中进行反应,反应结束后用超纯水将光纤洗净烘干;
c)将步骤b)的光纤一端的端面置于对甲苯磺酸甲酯的甲苯溶液中浸泡,反应结束后洗净吹干;
d)将步骤c)处理的光纤的端面置于4-马来酰亚胺基丁酸-N-琥珀酰亚胺酯的乙醇溶液中浸泡,反应结束后将光纤洗净备用;
e)将步骤d)处理的光纤的端面浸泡在抗SARS-CoV-2抗体溶液中,于4℃冰箱中反应过夜,反应结束后使用超纯水清洗光纤;
f)用BSA溶液封闭光纤端面未反应的位点,制作成所述功能化光纤探针。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述步骤a)中,所述多模光纤的直径为400~600微米,光纤数值孔径为0.18~0.22;所述光纤的长度为3-5厘米;
所述步骤b)中,所述食人鱼溶液为V(H2SO4):V(H2O2)=3:1的混合溶液;
所述步骤b)中,所述反应的条件为:于70℃中加热20-40分钟;
所述步骤c)中,所述对甲苯磺酸甲酯的甲苯溶液中对甲苯磺酸甲酯的质量浓度为1%~5%;所述浸泡的时间为1-3小时;
所述步骤d)中,所述4-马来酰亚胺基丁酸-N-琥珀酰亚胺酯的乙醇溶液中4-马来酰亚胺基丁酸-N-琥珀酰亚胺酯的浓度为10~50mM;所述浸泡的时间为0.5-2小时;
所述步骤e)中,所述抗SARS-CoV-2抗体溶液中抗SARS-CoV-2抗体的浓度为100μg/mL-1000μg/mL;所述抗SARS-CoV-2抗体为抗SARS-CoV-2IgG抗体或抗SARS-CoV-2 IgM抗体;
所述步骤f)中,所述BSA溶液的质量浓度为1%~5%;所述封闭的时间为2-3小时。
3.权利要求1或2所述方法制备得到的功能化光纤探针。
4.权利要求3所述的功能化光纤探针在制备检测SARS-CoV-2抗体的试剂盒中的应用。
5.权利要求3所述的功能化光纤探针和SARS-CoV-2抗体标准品在制备检测SARS-CoV-2抗体的试剂盒中的应用。
6.根据权利要求4或5所述的应用,其特征在于:所述SARS-CoV-2 抗体为SARS-CoV-2IgG抗体和/或SARS-CoV-2IgM抗体。
7.一种检测SARS-CoV-2抗体的试剂盒,包括权利要求3所述的功能化光纤探针。
8.根据权利要求7所述的试剂盒,其特征在于:所述检测SARS-CoV-2抗体的试剂盒中还包括SARS-CoV-2抗体标准品;
进一步的,所述检测SARS-CoV-2抗体的试剂盒中还包括载体,所述载体上记载了权利要求9或10所述的检测SARS-CoV-2抗体含量的方法。
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