[发明专利]大麦条纹病致病性基因Pgr03723及其应用

说明书

本发明提供大麦条纹病致病性基因Pgr03723及其应用，该基因来自麦类核腔菌Pyrenophora graminea。大麦条纹病属系统侵染性真菌病害，是大麦的主要病害之一，其病原菌主要有有性阶段和无性阶段，在世界各大麦种植区域均有分布，并且在上海、四川、浙江和江苏等长江流域地区受到严重危害。本发明通过RNA干扰技术获得Pgr03723干扰突变株，进一步提供了该基因参与调控菌株生长分化，为阐明大麦条纹病菌的致病机理、丰富植物病原菌的基因功能、大麦抗病新防治策略和抗病育种提供理论和现实意义。

技术领域

本发明属于分子生物工程领域，具体涉及大麦条纹病菌致病性基因Pgr03723的生物信息学分析及其调控菌丝生长速率；此外，采用RNAi技术构建该基因的干扰载体，通过遗传转化获得干扰株，可降低大麦条纹病的致病性的应用。

背景技术

大麦条纹病(Pyrenophora graminea)属系统侵染性真菌病害，是大麦的主要病害之一，其病原菌主要有有性阶段和无性阶段，有性阶段称麦类核腔菌[Pyrenophoragraminea(Rabenk.)Ito et Kurib.]，属子囊菌亚门、核腔菌属，无性阶段称禾内脐蠕孢[Drechslera graminea(Rabenh.ex Sch1.)Shoemaker，属半知菌亚门、内脐蠕抱属；在自然界中常见到的是其无性阶段，有性阶段比较少见。病原菌侵染大麦叶片或叶鞘时，分生孢子一般呈柱状，浅黄色到黄褐色，多数直，两端半球形，一般在基细胞处最宽向端部稍尖，1-7个隔膜，大小50-125μm×14-25.5μm，通常在顶细胞或基细胞处形成次生分生孢子梗，脐点明显，深陷于基部细胞内。分生孢子梗由气孔伸出，单生或少数丛生，柱状直或弯曲，不分枝，浅褐色到褐色。

目前，开展病原致病性研究和抗病品种选育的核心技术主要为植物种质资源的抗病性鉴定。由于自然选择的压力、寄主植物的抗病性基因和病原物的致病基因的协同进化，不同的大麦条纹病菌株对同一个抗病基因往往会表现出毒性的差异，因此，大麦条纹病在菌丝形态、生理特征及致病性上存在在着阶梯性差异。对大麦对条纹病的初步研究，其目的在于了解大麦和条纹病病原物在不同的环境条件下的互作关系，以及大麦如何产生抗病现象的规律性，进而有效地预防大麦条纹病的发生，提高大麦的品质和产量。

本研究以大麦条纹病强致病力菌株QWC为材料，以基因组测序结果为基础，筛选出与大麦条纹病菌效应基因Pgr03723，并对其分离克隆，通过RNAi的方法研究其功能，并从菌丝的形态、显微结构和致病性方面验证其相关功能，明确效应蛋白Pgr03723在大麦条纹病菌中致病性的功能机制，为阐明大麦条纹病菌的致病机理、丰富植物病原菌的基因功能、大麦抗病新防治策略和抗病育种提供理论和现实意义。

现有技术存在的问题：现有技术中未见大麦条纹病(麦类核腔菌)Pgr03723基因及RNA干扰该基因应用的报道。

发明内容

鉴于现有技术的不足，本发明提供了一种大麦条纹病(麦类核腔菌)致病性基因Pgr03723，以应对该病害靶标基因的需求，运用RNA干扰技术获得Pgr03723干扰突变体，并从菌丝的形态、显微结构和致病性方面验证其相关功能，明确效应蛋白Pgr03723在大麦条纹病菌中致病性的功能机制为了达到上述目的，本发明采用了如下的技术方案：

1.一种大麦条纹病(麦类核腔菌)致病性基因Pgr03723，该基因全长序列如SEQ IDNO：1所示。

2.一种大麦条纹病(麦类核腔菌)致病性基因Pgr03723获取方法，包括：

(1)大麦条纹病菌株的培养