[发明专利]一种酶复合材料及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种酶复合材料，其特征在于所述酶复合材料按如下方法制备：将咪唑配体与水混合，加入酶液，再添加交联剂，25℃交联反应20min，然后加入六水合硝酸锌水溶液，室温下磁力搅拌30-150min，4℃静置12h，反应液离心，沉淀干燥，制得酶复合材料；所述咪唑配体为2-氨基苯并咪唑与2-甲基咪唑以物质的量之比1:4-19的混合；所述交联剂为戊二醛；所述咪唑配体总物质的量与六水合硝酸锌水溶液中六水合硝酸锌物质的量之比为1：0.05-0.25；所述酶液中酶质量加入量以咪唑配体总物质的量计为100-500mg/mol；所述戊二醛加入体积终浓度为0.5-2.0%；所述酶来自嗜麦芽窄食单胞菌（Stenotrophomonas maltophilia）CCTCC NO:M 20191025，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期：2019年12月09日。

2.如权利要求1所述酶复合材料，其特征在于所述水的体积加入量以咪唑配体总物质的量计为300-800mL/mol。

3.如权利要求1所述酶复合材料，其特征在于所述反应液离心和沉淀干燥是指反应液在4℃、6000-8000rpm条件下离心20-30min，收集沉淀，再用超纯水洗涤2-3min后离心分离，重复2-3次，经0.05MPa下真空干燥8h后，得到酶复合材料。

4.如权利要求1所述酶复合材料，其特征在于所述酶液按如下步骤制备：将嗜麦芽窄食单胞菌（Stenotrophomonas maltophilia）CCTCC NO:M 20191025接种于LB固体培养基，30℃培养箱培养，获得斜面菌体；LB固体培养基组成：5g/L酵母膏，10g/L NaNO₃，10g/L 蛋白胨，18g/L琼脂，pH自然，溶剂为去离子水；将斜面菌体接种至LB液体培养基中，30℃、160rpm摇床培养24h，培养液4℃、8000rpm条件下离心20min，收集沉淀，再用0.05M，pH为7.0的磷酸缓冲溶液洗涤3min后离心分离，重复三次，将洗涤后的菌液用超声破胞仪在400W超声3秒，间歇2秒，循环工作99次条件下破胞，再4℃、8000rpm条件下离心30min，取上清液即为酶液；LB液体培养基组成：5g/L酵母膏，10g/L NaNO₃，10g/L 蛋白胨，pH自然，溶剂为去离子水。

5.一种权利要求1所述酶复合材料在降解卤代烃污染物中的应用。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于所述应用为：以酶复合材料为催化剂，以卤代烃为底物，以pH7.0、0.05M磷酸缓冲溶液为反应介质，在25℃水浴、150rpm条件下反应，降解卤代烃。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于所述催化剂加入量以缓冲液体积计为0.01-0.1 g/ml，所述底物加入终浓度为5-15 mg/L。