[发明专利]一种复合微生物制剂及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及农业微生物技术领域，具体涉及一种复合微生物制剂及其制备方法和应用。所述复合微生物制剂采用市售酿酒酵母和中国普通微生物菌种保藏管理中心保藏的保藏编号为CGMCC NO.13905的嗜麦芽寡养单胞菌，经菌种活化、制备发酵液、离心、复配等步骤制备而成。烟叶经过所述复合微生物制剂发酵后，烟叶化学成分协调性改善，巨豆三烯酮等6种致香成分含量明显增加，新生成了1‑己烯‑3‑醇等6种致香物质成分，烟叶品质明显提升。

技术领域

本发明涉及农业微生物技术领域，具体涉及一种复合微生物制剂及其制备方法和应用。

背景技术

烟叶发酵是提高烟叶可用性和卷烟感官质量的一种加工方法，经发酵后的烟叶，可以弥补烟叶本身不同程度的品质缺陷，如减轻烟叶本身的青杂气、降低刺激性，提升卷烟香气质和香气量，改善抽吸时的余味和吸味等。合适的发酵工艺可以极大改善烟叶的品质，提高卷烟质量，是卷烟加工中极为重要的步骤。

烟叶中含有上千种各种各样的化合物，包括非挥发性的大分子物质比如纤维素、淀粉、蛋白质以及果胶等；也含有大量的半挥发性和挥发性的小分子物质，比如各种酸类、醇类、醛类以及酯类等化合物。这些化合物的种类和含量比例决定了烟叶的品质。其中，淀粉是一类对烟叶品质影响比较大的多糖。烟叶淀粉含量过高，在烟支燃烧时会影响燃烧速度和燃烧的完全性，而且会产生焦糊味和杂气，降低卷烟的感官质量。而小分子的醇类、醛类、酯类、酮类、吡啶类以及吡嗪类等物质则对烟叶的香气品质有重要影响。

烟叶发酵过程与其表面存在大量并且种类繁多的微生物密切相关。在烟叶发酵过程中，这些微生物可以将烟叶中的一些大分子物质如蛋白质、淀粉降解为单糖和氨基酸等一些小分子，然后这些小分子物质在经过一系列反应可以生成醇、醛、酸、酯、酮等香味成分。筛选合适的微生物用于发酵烟叶，将烟叶中的淀粉转化为还原糖，可以减少卷烟的杂气，改善口感。利用微生物在烟叶发酵过程中代谢生成各种与烟气相谐调的香味物质，使烟叶化学成分间趋于协调，则可以提高烟叶的香气品质。

发明内容

因此，本发明要解决的技术问题在于提高烟叶的香气品质，从而提供一种复合微生物制剂、制备复合微生物制剂的方法、复合微生物制剂在烟叶发酵和/或提高烟叶的香气品质中的应用。

第一方面：本发明提供一种复合微生物制剂，包含酿酒酵母和嗜麦芽寡养单胞菌；酿酒酵母和嗜麦芽寡养单胞菌的活菌数比为1：2至2：1。

可选的，酿酒酵母和嗜麦芽寡养单胞菌的活菌数比为1：1。

可选的，所述酿酒酵母为购自安琪酵母股份有限公司的耐高温酿酒高活性干酵母。

可选的，所述嗜麦芽寡养单胞菌为中国普通微生物菌种保藏管理中心保藏的保藏编号为CGMCC NO.13905的菌株。

第二方面：一种制备复合微生物制剂的方法，所述复合微生物制剂的制备方法包括如下步骤：

(1)制备发酵液，将活化后的酿酒酵母和嗜麦芽寡养单胞菌分别接种到发酵培养基中发酵制备得到发酵液；

(2)将两株菌的发酵液复配。

可选的，所述步骤(2)具体包括如下步骤：将发酵液离心，除去上清液，收集湿菌体，重悬菌体得菌液，按比例将两株菌的菌液进行复配；

可选的，所述方法还包括菌种活化培养的步骤：分别挑取酿酒酵母和嗜麦芽寡养单胞菌菌株，接种到活化培养基中进行活化，即得活化后的酿酒酵母和嗜麦芽寡养单胞菌；

所述活化培养基为PDA培养基；活化培养时间为12h至72h；活化培养的温度为28-30℃；

可选的，制备发酵液的步骤中还包括制备种子液的步骤，包括将活化后的酿酒酵母接种到M1培养基中，25℃至35℃、150-200rpm培养12至36小时，制备得到酿酒酵母种子液；