[发明专利]新型肌肉高效亲和腺相关病毒血清型及相关应用

权利要求书

1.一种腺相关病毒5(AAV5)衣壳突变体，其特征在于，所述的AAV5衣壳突变体具有选自下组特性：

(a)特异性靶向肌肉细胞；

(b)肌肉细胞高转导率，所述的肌肉细胞高转导率是指：所述的AAV5衣壳突变体在肌肉细胞中的转导率是其他AAV衣壳的2-3倍(较佳地可达到3倍)；和

(c)低免疫原性，所述的低免疫原性是指：所述AAV5衣壳突变体在免疫应答中所产生的中和抗体滴度值≤1:4(较佳地≤1:2，更佳地≤1:1)。

2.如权利要求1所述的AAV5衣壳突变体，其特征在于，所述AAV5衣壳突变体具有选自下组的氨基酸序列：

(i)在对应于野生型AAV5衣壳蛋白的氨基酸序列的第560至585位(较佳地为第Q574位)后插入一段PGPSPAD(SEQ ID NO:3)，从而获得的氨基酸序列；

(ii)在(i)的氨基酸序列的基础上，进行一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、改变或插入，或在其N端或C端添加1至10个氨基酸残基(较佳地1至5个氨基酸残基，更佳地1至3个氨基酸残基)，并且保留与(i)具有≥85％(优选地≥90％，更优选地≥95％，例如≥96％、≥97％、≥98％或≥99％)的序列同一性的氨基酸序列。

3.如权利要求1所述的AAV5衣壳突变体，其特征在于，所述AAV5衣壳突变体具有选自下组的氨基酸序列：

(i)如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列；和

(ii)在如SEQ ID NO:2所示序列的基础上，进行一个或多个氨基酸残基的替换、缺失、改变或插入，或在其N端或C端添加1至10个氨基酸残基(较佳地1至5个氨基酸残基，更佳地1至3个氨基酸残基)，从而获得的氨基酸序列；并且所述获得的氨基酸序列与如SEQ ID NO:2所示序列具有≥85％(优选地≥90％，更优选地≥95％，例如≥96％、≥97％、≥98％或≥99％)的序列同一性。

4.一种AAV病毒颗粒，其特征在于，所述AAV病毒颗粒包括：

(i)如权利要求1所述的AAV5衣壳突变体；和

(ii)包装于所述AAV5衣壳突变体中的核酸，所述核酸包括重组病毒基因核酸序列。

5.一种用于生产如权利要求4所述的AAV病毒颗粒的基因工程细胞，其特征在于，所述基因工程细胞中含有：

(i)第一核酸构建物，所述的第一核酸构建物中含有重组病毒基因核酸序列；和

(ii)第二核酸构建物，所述的第二核酸构建物中含有AAV包装所需的rep和cap基因，其中cap基因编码如权利要求1所述的AAV5衣壳突变体。

6.如权利要求1所述的AAV5衣壳突变体或如权利要求4所述的AAV病毒颗粒在制备药物中的用途，其特征在于，所述的药物选自下组：

(i)用于治疗骨骼肌相关疾病的药物组合物；

(ii)其他用于全身性治疗的药物组合物；和/或

(iii)用于免疫防疫的疫苗组合物。

7.如权利要求6所述的用途，其特征在于，所述的骨骼肌相关疾病包括：Duchenne肌营养不良(DMD)、Emery-Dreifuss肌营养不良(EDMD)、肢带肌营养不良(LGMD)、重症肌无力、先天性肌无力综合症、肌萎缩性侧索硬化症(ALS)、I型和II型肌强直性营养不良等。

8.如权利要求6所述的用途，其特征在于，所述用于全身性治疗的药物组合物是指用于肿瘤靶向治疗的药物。

9.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括以下组分：

(i)如权利要求4所述的AAV病毒颗粒；和

(ii)药学上可接受的载体。

10.如权利要求9所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物的剂型包括但不限于：肌肉注射剂、腹腔注射剂、静脉注射剂，或其组合。