[发明专利]樟疫霉效应子蛋白Avh49及其应用

说明书

本发明公开了一种来源于樟疫霉的效应子蛋白Avh49及其编码基因和应用。该蛋白是具有序列表中的SEQIDNO：1的氨基酸序列。实验证明，该基因控制表达的蛋白质能够参与樟疫霉侵染本氏烟草的过程，具有诱导植物细胞死亡的功能。本发明对于充实植物病原卵菌与寄主互作的分子机制资料信息，以及建立植物病原卵菌病害的综合防治技术策略均有重要意义。

技术领域

本发明属于樟疫霉效应子技术领域，具体涉及一种樟疫霉效应子蛋白Avh49及其应用。

背景技术

樟疫霉(Phytophthora cinnamomi)是已知的最具破坏性的植物病原卵菌之一，在世界范围内广泛分布，寄主范围接近5000种。作为一类半活体营养的病原卵菌，樟疫霉在侵染寄主的初期营活体营养，待成功侵入之后转入死体营养阶段。这就意味着在和寄主互作中樟疫霉可能通过复杂的过程来操纵植物的细胞死亡；在活体营养阶段，抑制寄主细胞死亡被认为是重要的侵染策略；而在向死体营养阶段的转换过程中，植物程序性细胞死亡则可能被其利用以适应致病过程和完成生活史。疫霉菌在形态上类似丝状真菌，但在进化和遗传背景上差距较大，因此传统的杀真菌剂对其作用不明显。目前我国生产上主要依靠抗病品种和国外专利农药进行防治，成本较高。疫霉菌在林间变异迅速、复杂，一般抗病品种推广8～15年后就会丧失抗性。目前为止所有的已知抗病基因均被疫霉菌攻克，迫切需要拓宽新的抗病基因资源。

在与植物的互作过程中，疫霉菌分泌大量的效应子(Effector) 来调控植物的生长发育及免疫反应以利于自身的侵染，是疫霉菌分泌到细胞外攻击寄主的关键武器。绝大多数动植物病原物通过各种机制输送分泌效应蛋白到寄主植物细胞内，从而对于寄主细胞的生化、生理过程及细胞代谢等产生显著影响，促进自身的侵染或者激活寄主的防卫反应。效应子基因在植物互作过程中具有重要意义。现有技术中报道，樟疫霉效应子蛋白Avh87基因能够诱导凋亡前体蛋白Bax诱导的植物细胞死亡，但是仅一个效应子蛋白对于樟疫霉致病过程仅侵染机理的研究是远远不够的，且不同效应子蛋白的结构也完全不同。

综上所述，深入了解樟疫霉的致病过程和侵染机理，针对性的开发新的农药靶标和防治策略，是亟待研究的课题。

发明内容

针对现有技术存在的上述问题，本发明的目的在于提供具有诱导植物细胞凋亡的樟疫霉效应子蛋白Avh49，其可有效诱导植物细胞凋亡。本发明还有一目的是提供该蛋白的编码基因及其重组载体，可以用于转基因植物或诱导植物细胞死亡的产品。

第一方面，本发明提供了樟疫霉效应子蛋白Avh49，所述蛋白如 1)至3)任一所示，

1)氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示；

MRRNLARLLIAAALLTVASEALSTVTDEEQAQISELGEEVIIRP KRLLRAVSKIDEDEERAILGEQVLLKWSKLAEKHNLQTLSKKLAD KAWLTGKKADHKAWLKAGKNPQDKFKEYGWKGKAWEELKKDP RYARYDGFDDAWMKKQRKKGTIHTVDNWIKLWNEQQKKAAG(S EQ ID NO：1)

2)由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

3)将1)或2)所示的氨基酸序列经一个或几个氨基酸残基的取代/缺失/添加，并具有效应子功能的蛋白质。

上述Avh49蛋白质可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。上述Avh49编码基因可通过将序列表中SEQ ID NO： 2所示的核苷酸序列缺失一个或几个氨基酸的密码子，和/或进行一个或几个碱基对的错义突变，和/或在其5'端和/或3'端连上本领域常用标签的编码序列得到。

第二方面，本发明提供了编码上述第一方面所述蛋白的核酸分子，所述核酸分子如下a)至b)任一所示，

a)核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示；