[发明专利]基于多肽芯片的抗体特异性结合的多肽的筛选方法及其筛选的多肽的应用

权利要求书

1.一种基于多肽芯片的抗体特异性结合的多肽的筛选方法，其特征在于，所述筛选方法包括：

在封闭及非封闭的条件下，分别使用所述多肽芯片对第一抗体阳性样本和第一抗体阴性样本进行特异性结合多肽的第一次筛选，对应获得封闭条件下的第一种子肽库和非封闭条件下的第一种子肽库；

对所述封闭条件下的第一种子肽库和所述非封闭条件下的第一种子肽库中的多肽取交集，得到第二种子肽库；

在封闭的条件下，使用所述多肽芯片对第二抗体阳性样本和第二抗体阴性样本进行特异性结合多肽的第二次筛选，得到第三种子肽库；

取所述第三种子肽库与所述第二种子肽库的交集，得到第四种子肽库；

其中，所述第一抗体阳性样本为一个或多个含单一抗体的样本稀释液，所述第二抗体阳性样本为一个或多个含单一抗体的血清样本，所述第一抗体阴性样本为不含所述单一抗体的样本稀释液，所述第二抗体阴性样本为不含所述单一抗体的血清样本；或者

所述第一抗体阳性样本为一组或多组含混合抗体的样本稀释液，所述第二抗体阳性样本为一组或多组含混合抗体的血清样本，所述第一抗体阴性样本为不含所述混合抗体的样本稀释液，所述第二抗体阴性样本为不含所述混合抗体的血清样本。

2.根据权利要求1所述的筛选方法，其特征在于，所述第一抗体阳性样本为多个含单一抗体的样本稀释液，所述第二抗体阳性样本为多个含单一抗体的血清样本，所述第一抗体阴性样本为不含所述单一抗体的样本稀释液，所述第二抗体阴性样本为不含所述单一抗体的血清样本，所述筛选方法还包括排除多个不同的所述单一抗体之间存在交集的多肽；

优选地，在以下任意一个或多个时机排除多个不同的所述单一抗体之间存在交集的多肽：

a.在所述非封闭条件下进行所述第一次筛选之后；

b.在所述封闭条件下进行所述第一次筛选之后；

c.在进行所述第二次筛选之后。

3.根据权利要求1所述的筛选方法，其特征在于，所述第一抗体阳性样本为多组含混合抗体的样本稀释液，所述第二抗体阳性样本为多组含混合抗体的血清样本，所述第一抗体阴性样本为不含所述混合抗体的样本稀释液，所述第二抗体阴性样本为不含所述混合抗体的血清样本，且任意两组所述含混合抗体的样本稀释液和/或任意两组所述含混合抗体的血清样本之间所含的抗体种类不重叠，则所述筛选方法还包括排除多组不同的所述混合抗体之间存在交集的多肽；

优选地，在以下任意一个或多个时机排除多组不同的所述混合抗体之间存在交集的多肽：

a.在所述非封闭条件下进行所述第一次筛选之后；

b.在所述封闭条件下进行所述第一次筛选之后；

c.在进行所述第二次筛选之后。

4.根据权利要求1-3中任意一项所述的筛选方法，其特征在于，在所述非封闭条件下和/或所述非封闭条件下，均采用两个或两个以上不同抗体浓度的所述第一抗体阳性样本进行所述第一次筛选；

优选地，在所述非封闭条件下采用两个以上不同抗体浓度的所述第一抗体阳性样本进行所述第一次筛选，并确定两个不同抗体浓度的所述第一抗体阳性样本进行所述封闭条件下的所述第一次筛选；

优选地，所述第一抗体阳性样本中所含的单一抗体的浓度或所述混合抗体中每个单一抗体的浓度为10ng/mL～1μg/mL，更优选为50ng/mL-500ng/mL；

优选地，采用两个或两个以上不同抗体浓度的所述第二抗体阳性样本进行所述第二次筛选，更优选地，所述第二抗体阳性样本中所含的单一抗体的浓度或所述混合抗体中每个单一抗体的浓度为10ng/mL-1μg/mL，进一步优选为50ng/mL-500ng/mL。