[发明专利]跨膜蛋白及内质网脂筏蛋白或其编码基因的拮抗剂或抑制剂的用途

说明书

本发明公开了一种跨膜蛋白及内质网脂筏蛋白或其编码基因的拮抗剂或抑制剂的用途，我们运用多步亲和纯化方法结合质谱分析，发现内质网脂筏蛋白1和2(ERLIN1，ERLIN2)能与TM6SF2及载脂蛋白B(apolipoprotein B，APOB)相作用。ERLINs与TM6SF2相互稳定对方，同时TM6SF2通过两个内质网腔区段与APOB结合。ERLINs虽然并不直接结合APOB，但能通过稳定TM6SF2间接稳定APOB。E167K突变通过降低TM6SF2蛋白水平从而影响APOB稳定性。在小鼠中利用腺病毒相关病毒降低Tm6sf2或ERLINs蛋白表达均能降低肝脏APOB蛋白量，从而造成血液中脂质水平的降低。本发明提供新的治疗血脂异常的靶点和策略。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体地说涉及跨膜蛋白6家族成员2(TM6SF2) 蛋白、内质网脂筏蛋白1和2(ERLIN1，ERLIN2)的用途。

背景技术

TM6SF2与血液中脂质的关系

TM6SF2是位于19号染色体上的一个编码351个氨基酸的多次跨膜蛋白的基因。在2000年它作为TM6SF1的平行同源基因被克隆出来，被L. Carim-Todd第一次报道(L.Carim-Todd,2000)。直到2014年，数个研究团队几乎同时通过全基因组关联研究(genome-wideassociation study，GWAS) 这一研究手段发现了除PNPLA3基因外，另一个与非酒精性脂肪肝显著相关的单碱基突变位点rs58542926，这一突变位点就位于TM6SF2基因上，它导致了多次跨膜蛋白TM6SF2的E167K突变，这一突变会导致蛋白在167位发生由谷氨酸变为赖氨酸的非同义突变(E167K)(Holmen et al.,2014；Kozlitina et al., 2014)。

TM6SF2蛋白主要在肝脏，小肠和肾脏三个组织中高表达。它的亚细胞定位主要定位于内质网(ER)，内质网高尔基(ER-Golgi)中间体以及肝细胞和肠细胞的高尔基体上(Mahdessian et al.,2014；Smagris et al.,2016)。近年来，许多研究集中于脂质代谢中的TM6SF2的作用，这些研究证实了TM6SF2与非酒精性脂肪肝疾病(NAFLD)以及心血管疾病(cardiovascular disease，CVD)之间的关联性(Holmen et al.,2014；Pirola andSookoian,2015)。Oddgeir等人通过对5643位挪威人的血脂指标的全基因组关联研究分析发现TM6SF2的 rs58542926突变会降低血液中总胆固醇含量并且降低人群冠状动脉疾病风险 (Holmen et al.,2014)。同样Pirola等人发现rs58542926突变在调节脂质水平中有着重要作用，它降低了血液内总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇以及甘油三酯水平，而这些指标是心血管疾病的重要影响因素，这些血脂含量的降低使贻患心血管疾病的风险降低(Pirola and Sookoian,2015)。

几项全基因组关联研究表明，TM6SF2作为19p12基因座的功能基因与血浆脂质密切相关，多数研究集中在rs58542926突变对血浆脂质的影响(Daly et al., 2014；Dongiovanni et al.,2014；Holmen et al.,2014；Kozlitina et al., 2014；Liu et al.，2014；Zhou et al.,2014)。rs58542926突变是在TM6SF2 基因的编码核苷酸499位中用腺嘌呤取代鸟嘌呤，造成在氨基酸残基167位置用赖氨酸替代谷氨酸(rs58542926c.499CT，p.Glu167Lys，E167K)(Kozlitina et al.,2014)。E167K变异导致蛋白折叠错误，细胞内降解加速(Kozlitina et al.,2014)，蛋白质更新率增加(Ehrhardt et al.,2017)，造成TM6SF2蛋白质水平和基因功能的降低。总的来说，非同义变体的等位基因可降低血浆脂蛋白浓度 (Holmen et al.,2014；Kozlitina et al.,2014；O’Hare et al.,2017；Pirolaand Sookoian,2015)。