[发明专利]一种专杀真菌的抗菌肽GL4W及其制备方法和应用

说明书

本发明提供一种专杀真菌的抗菌肽GL4W及其制备方法和应用，抗菌肽GL4W其序列如SEQ ID No.1所示。以抗菌肽L4(RLRLLLRLR)为活性中心，在其N端用甘氨酸形成帽子结构并在其C端添加色氨酸形成尾端锚定结构设计出抗菌肽，命名为GL4W。抗菌肽GL4W在制备治疗真菌引发的感染性疾病药物中的应用。本发明改变了抗菌肽L4的抗菌谱，成为一种专杀真菌的抗菌肽，并且提高了抗菌肽对细菌细胞的选择性，其成为抗真菌感染药物的发展潜力，抗菌肽GL4W的治疗指数高达39.61。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种专杀真菌的抗菌肽GL4W及其制备方法和应用。

背景技术

全球真菌感染率继续上升，真菌感染正在给全球医疗保健系统带来越来越大的临床负担，但可以对抗这些疾病的治疗选择仍然仅限于四种主要的抗真菌药物类别，即多烯类、三唑类、尼可霉素类和棘白菌素类。由于真核病原体中的一些有效药物靶点往往与人类基因/基因产物所共有，导致开发安全/无毒的抗真菌药物比开发抗细菌药物更具挑战性。

抗菌肽是动物机体抵御外界微生物侵害及清除体内突变细胞的一类小分子多肽，具有广谱抗菌、无毒性、无耐药性、无残留与无污染等优点，而且其热稳定性好，添加剂量小，完全符合畜产品安全生产的需要，适合在饲料生产过程中使用，极具有作为新一代饲料添加剂的潜质。而且抗菌肽的抑菌机理与抗生素不同，抗菌肽是通过破坏细菌的细胞膜结构，使细胞内溶物外泄，从而杀死细胞，所以不易产生耐药性。更为重要的是，抗菌肽对真核细胞几乎没有作用，只作用于原核细胞和发生病变的真核细胞。据上述原因，抗菌肽完全有可能取代抗生素成为一类新型、高效、低毒、无残留的抗菌物质，具有广阔的应用前景。

虽然现有的一种抗菌肽L4(RLRLLLRLR-NH2)具有较好的抗真菌(GM＝8.00μM)与抗细菌(GM＝4.76μM)的抗菌活性，但其抗菌谱较广，而广谱抗菌药物的使用对机体菌群平衡的破坏能够引起继发感染且更易产生耐药性。

发明内容

基于以上不足之处，本发明的目的在于提供一种专杀真菌的抗菌肽GL4W，其没有抗细菌的活性，是一种专杀真菌的抗菌肽。

本发明的目的通过如下技术实现：一种专杀真菌的抗菌肽GL4W，其序列如SEQ IDNo.1所示。

本发明的另一目的是提供一种专杀真菌的抗菌肽GL4W的制备方法，如下：

(1)以抗菌肽L4为活性中心，其氨基酸序列为：RLRLLLRLR，在其N端用甘氨酸形成帽子结构，并在其C段添加色氨酸形成尾端锚定结构；

(2)采用固相化学合成法通过多肽合成仪得到肽树脂，将得到的肽树脂经过TFA切割后，得到抗菌肽GL4W；

(3)经过反相高效液相色谱纯化和质谱鉴定后，即完成抗菌肽GL4W的制备。

进一步的，本发明的另一目的是提供一种专杀真菌的抗菌肽GL4W在制备治疗真菌引发的感染性疾病药物中的应用。

本发明具有如下优点及有益效果：抗菌肽GL4W具有很高的细胞选择性，对得到的抗菌肽进行抗细菌、抗真菌和溶血活性检测，发现抗菌肽GL4W对13种细菌(革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌)没有抗菌活性，但对白色念珠球菌等13种真菌有明显的抑制作用，且几乎没有溶血活性。GL4W的治疗指数高达39.61。综上所述，GL4W是一种具有较高应用价值的抗真菌肽。

附图说明

图1为抗菌肽GL4W的质谱图。

具体实施方式

下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实施例1

抗菌肽的设计