[发明专利]表达人EPO的经遗传修饰的非人动物

权利要求书

1.一种用于生成经遗传修饰的啮齿动物的方法，其包含：

生成包含下述各项的啮齿动物：

与啮齿动物EPO基因基因座处的内源啮齿动物EPO启动子可操作连接的编码人EPO(hEPO)蛋白质的核酸序列，其中所述可操作连接导致所述啮齿动物EPO基因基因座处的啮齿动物EPO基因中的无效突变，

与啮齿动物M-CSF基因基因座处的内源啮齿动物M-CSF启动子可操作连接的编码人M-CSF(hM-CSF)蛋白质的核酸序列，其中所述啮齿动物对于所述啮齿动物M-CSF基因是杂合无效或纯合无效的，

与啮齿动物IL-3基因基因座处的内源啮齿动物IL-3启动子可操作连接的编码人IL-3(hIL-3)蛋白质的核酸序列，其中所述啮齿动物对于所述啮齿动物IL-3基因是杂合无效或纯合无效的，

与啮齿动物GM-CSF基因基因座处的内源啮齿动物GM-CSF启动子可操作连接的编码人GM-CSF(hGM-CSF)蛋白质的核酸序列，其中所述啮齿动物对于所述啮齿动物GM-CSF基因是杂合无效或纯合无效的，

与啮齿动物TPO基因基因座处的内源啮齿动物TPO启动子可操作连接的编码人TPO(hTPO)蛋白质的核酸序列，其中所述啮齿动物对于所述啮齿动物TPO基因是杂合无效或纯合无效的，和

编码人Sirpa(hSirpa)蛋白质的Sirpa转基因，其中所述啮齿动物表达hSirpa蛋白质，

其中所述经遗传修饰的啮齿动物是免疫缺陷的。

2.依照权利要求1的方法，其中所述啮齿动物对于包含所述编码hEPO的核酸序列的等位基因是纯合的。

3.依照权利要求1或2的方法，其中所述编码hEPO的核酸序列包含人EPO基因组编码和非编码序列。

4.依照权利要求1-3任一项的方法，其中所述编码hEPO的核酸序列包含人EPO cDNA序列。

5.依照权利要求1-4任一项的方法，其中所述啮齿动物对于所述编码hTPO的核酸序列，所述编码hM-CSF的核酸序列，所述编码hIL-3的核酸序列，和所述编码hGM-CSF的核酸序列是纯合的。

6.依照权利要求1-5任一项的方法，其中所述啮齿动物进一步包含人造血细胞的移入，其中任选地所述人造血细胞包含一种或多种选自下组的细胞：人CD34阳性细胞，人造血干细胞，人髓样细胞前体细胞，人类红细胞前体细胞，人髓样细胞，人树突细胞，人单核细胞，人粒细胞，人红细胞，人嗜中性粒细胞，人肥大细胞，人胸腺细胞，和人B淋巴细胞。

7.依照权利要求6的方法，其中所述啮齿动物包含氯膦酸盐。

8.依照权利要求7的方法，其中所述啮齿动物进一步包含靶向类红细胞谱系的人细胞的病原体的感染，其中任选地所述病原体选自疟原虫(Plasmodium sp.)，巴贝虫(Babesiasp.)，和泰勒虫(Theileri sp.)。

9.依照权利要求1-8任一项的方法，其中所述免疫缺陷是由Rag2和Il2rg二者的缺陷引起的。

10.依照权利要求1-9任一项的方法，其中所述啮齿动物是小鼠。

11.一种用于生成经遗传修饰的小鼠的方法，其中所述经遗传修饰的小鼠为

MISTER-G小鼠，

SupER-G小鼠，

MITERG小鼠，

MITRG小鼠，或

TIES小鼠。

12.一种或多种选自下组的寡核苷酸及其用途：

CATCTGCGACAGTCGAGTTC(SEQ ID NO:8)；

CCAGGGAGCTTACCGTGAC(SEQ ID NO:9)；

FAM-AGGTACATCTTAGAGGCCAAGGAGGCA-BHQ(SEQ ID NO:10)；

ACAGCCGAGTCCTGGAGAG(SEQ ID NO:11)；

AAGCCCTGAGCGTGAGTTC(SEQ ID NO:12)；

FAM-AGGCCAAGGAGGCCGAGAATATCACG-BHQ(SEQ ID NO:13)；

GAGCCCTGCACTGGACAAC(SEQ ID NO:14)；

TCCCATGAACGCTGAGAGTC(SEQ ID NO:15)；和

AGGGTCAAGGAGCCATAGACAGAATGGC(SEQ ID NO:16)。