[发明专利]丁苯吗啉对映体拆分及在农产品中的残留分析方法

权利要求书

1.丁苯吗啉对映体拆分，其特征在于包括以下步骤：

1）丁苯吗啉外消旋体溶液的配制：称取丁苯吗啉外消旋体样品，采用甲醇或乙腈配制成丁苯吗啉外消旋体溶液，备用；

2）丁苯吗啉外消旋体的分离：以步骤1）配制的丁苯吗啉外消旋体溶液为标准溶液进样，利用液相色谱紫外检测器在一定的色谱条件下洗脱分离丁苯吗啉外消旋体，得到两个峰值，分别为丁苯吗啉外消旋体中的两个对映单体，同时在馏分收集器中收集丁苯吗啉手性单体馏分；

3）丁苯吗啉外消旋体两个单体的确证：以步骤1）配制的丁苯吗啉外消旋体溶液为标准溶液进样，利用液相色谱激光偏振仪检测器在一定的色谱条件下洗脱分离检测丁苯吗啉外消旋体，确定先流出的为（-）-丁苯吗啉，后流出的为（+）-丁苯吗啉；

其中，步骤2）和步骤3）中一定的色谱条件为采用Superchiral S-OJ色谱柱分离，色谱柱规格为0.46cm I.D.× 15cm L, 5µm，流动相为甲醇/二乙胺，体积比为100/0.05，流速0.80 mL min^-1，进样量20 µL，柱温30℃，紫外检测器波长230 nm，激光偏振仪检测器波长670nm。

2.如权利要求1所述的丁苯吗啉对映体拆分，其特征在于步骤1）中丁苯吗啉外消旋体溶液浓度为0.0025-10000 mg L^-1。

3.丁苯吗啉对映体在农产品中的残留分析方法，其特征在于包括以下步骤：

1）农产品样品的提取净化，将农产品样品采用酸化水溶液和乙腈混合提取，盐析后，C₁₈、PSA和GCB分散固相萃取净化，浓缩后乙腈/水定容，用带质谱检测器的液相色谱仪基质外标法检测；

2） 取配制好的丁苯吗啉外消旋体溶液，分别用体积比4：6的乙腈/水稀释成混合标准溶液20 mg/L，然后将步骤1）处理后农产品样品基质用体积比4:6的乙腈/水分别配制成5.0、2.50、1.0、0.25、0.05、0.010和0.0025 mg/L的基质标准溶液，对映单体浓度为一半，超高效液相色谱串联质谱仪UPLC-MS/MS进样分析，每个浓度测定3次，以浓度为横坐标x，峰面积平均值为纵坐标y，得到不同基质中丁苯吗啉对映体标准曲线和线性相关系数；

3）计算添加回收率、相对标准偏差、方法的检测限和定量限，满足残留分析要求；将按照步骤1）处理后的农产品实际样品中的丁苯吗啉对映体采用基质外标法计算残留量；

其中，步骤2）中超高效液相色谱条件为：3 μm×150 mm×2 mm Lux®3 μm Cellulose-3色谱柱；柱温50℃；进样量5μL；流速0.35 mL/min；流动相A为5mmol/L乙酸铵水溶液，B为0.1%甲酸乙腈；梯度洗脱程序为： 0-10.0 min，16%-22% B；10.0-11.0 min，22%-95% B， 保持3 min的95% B； 14.0-14.2min，95%-16%B，随后保持1.8 min的16%B，整个分析时间16min。

4.如权利要求3所述的丁苯吗啉对映体在农产品中的残留分析方法，其特征在于步骤1）中农产品样品的提取净化的具体过程为：将农产品样品磨碎后称取2-10g至离心管中，加入10mL的2%甲酸水溶液，充分涡旋混匀后，再加入20mL乙腈，涡旋混匀后均质，再加入5gNaCl，涡旋混匀后均质再离心，吸取8mL上层溶液至装有50mg C₁₈、20mg GCB和20mg PSA的10mL离心管中，涡旋震荡净化1min后离心，过膜吸取上清液6mL于50mL鸡心瓶中，旋转浓缩干后，加入1.2mL 体积比为4：6的乙腈/水超声辅助溶解定容，过0.22μm滤膜至进样瓶中，UPLC-MS/MS基质外标法定量待测。

5.如权利要求3所述的丁苯吗啉对映体在农产品中的残留分析方法，其特征在于步骤2）中质谱仪的质谱条件为：电喷雾正电离多反应检测模式ESI⁺-MRM；电喷雾毛细管电压3.5kV；离子源温度150 ℃；脱溶剂气N₂温度350℃，流速700 L/h；锥孔反吹气N₂流速50 L/h；碰撞气Ar流速0.30 mL/min；电子倍增器倍增电压700V；二级母离子驻留时间0.02s；丁苯吗啉对映体母离子m/z 304.2，锥孔电压30 V，定量子离子m/z 147和定性子离子m/z 98，碰撞电压均为30 eV。