[发明专利]一株兔金黄色葡萄球菌及其在制备灭活疫苗中的应用

说明书

本发明公开了一株兔金黄色葡萄球菌及其在制备灭活疫苗中的应用。本发明从多例病死兔的化脓性肺炎肺脏样品、乳房炎样品和脚皮炎样品中，通过细菌分离和鉴定以及动物回归试验，筛选出一株对兔具有强致病性的金黄色葡萄球菌SA472，其保藏编号为CCTCC NO：M 2021200。本发明还公开了金黄色葡萄球菌SA472在制备灭活疫苗中的应用，包括：菌株扩大培养获得菌液，菌液灭活获得灭活菌液，加入佐剂混合均匀获得灭活疫苗。本发明的灭活疫苗安全性高，免疫后产生的抗体效价高，能有效地预防金黄色葡萄球菌感染兔的发生。

技术领域

本发明涉及疫苗制备技术领域，具体涉及一株兔金黄色葡萄球菌及其在制备灭活疫苗中的应用。

背景技术

兔葡萄球菌病是由金黄色葡萄球菌感染兔引起的一种传染性疾病。该病一年四季均有发生，尤其高温高湿的季节多发。该病对种公兔和种母兔的危害尤为严重，临床上主要表现为乳房炎、脚皮炎和呼吸道症状。金黄色葡萄球菌感染导致的乳房炎、脚皮炎和呼吸道症状不仅严重地影响种公兔和种母兔的生产性能还导致种公兔和种母兔的淘汰或死亡，给养兔场造成巨大的经济损失。研究调查发现，金黄色葡萄球菌在我国兔群中广泛流行，是危害我国兔产业发展的重要病原。目前，我国还没有针对兔葡萄球菌病的商品化疫苗，该病的防治主要还是依赖于药物，然而药物使用的种种弊端也日益凸显，如耐药金黄色葡萄球菌的产生（尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的产生）和药物残留等。因此，进行兔葡萄球菌病疫苗的研制用于预防和控制该病具有重要意义。

发明内容

为了解决上述问题，本发明的目的之一是提供一株兔金黄色葡萄球菌，该菌株对兔的致病性强，制备的灭活疫苗安全，且该灭活疫苗具有良好的免疫保护性。

所述的兔金黄色葡萄球菌是从多例病死兔的化脓性肺炎肺脏样品、乳房炎样品和脚皮炎样品中，通过细菌分离和鉴定以及动物回归试验，筛选出的对兔具有强致病性的金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）SA472，该菌株于2021年3月3日在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为CCTCC NO：M 2021200，中国典型培养物保藏中心地址为中国，武汉，武汉大学。

本发明的目的之二是提供一种兔金黄色葡萄球菌灭活疫苗，所述兔金黄色葡萄球菌灭活疫苗，是通过以下技术方案来实现的：

兔金黄色葡萄球菌为金黄色葡萄球菌SA472。

兔金黄色葡萄球菌灭活疫苗中金黄色葡萄球菌SA472的抗原含量不低于9.0×10¹⁰CFU/mL，体积终浓度为10%的法国赛比克公司的商品化MONTANIDE^TM GEL 02 PR佐剂。

1.灭活菌液的制备；

2.灭活疫苗的配制。

步骤1所述的灭活菌液的制备，包括以下步骤：将金黄色葡萄球菌SA472以1%（V/V）接种到脑心浸液培养基，37℃ 180rpm培养24小时，获得菌液，向菌液中加入体积终浓度为0.3%的甲醛，37℃ 100rpm灭活24小时，获得灭活菌液。

步骤2所述的灭活疫苗的配制，包括以下步骤：将灭活菌液和法国赛比克公司的商品化MONTANIDE^TM GEL 02 PR佐剂按体积比为9:1混合均匀，获得灭活疫苗。

进一步地，将上述方法制备得到的疫苗应用于兔养殖过程中。

本发明的有益效果在于：本发明从多例病死兔的化脓性肺炎肺脏样品、乳房炎样品和脚皮炎样品中，通过细菌分离和鉴定以及动物回归试验，筛选出一株对兔具有强致病性的金黄色葡萄球菌SA472，本发明的灭活疫苗制备方法简单，安全性好，能有效地预防金黄色葡萄球菌感染兔的发生。

附图说明