[发明专利]下调TRIM56基因表达的siRNA及其应用

说明书

本发明涉及生物医药技术领域，特别涉及下调TRIM56基因表达的siRNA及其应用，本发明通过研究分析发现TRIM56基因与细胞自噬蛋白呈负相关，具体为，上调TRIM56基因，则LC3BII基因下调，p62基因上调食管癌细胞Eca‑109自噬功能减弱；而下调TRIM56基因，则LC3BII基因上调，p62基因下调食管癌细胞Eca‑109自噬功能增强；同时在设计下调的siRNA中，发现当使用siRNA干扰TRIM56基因表达、下调时，食管癌细胞Eca‑109自噬功能增强时，其细胞生长受到抑制，有一定的食管癌治疗作用，同时，siRNA也用于制备相应的药物，来对食管癌进行治疗。

【技术领域】

本发明涉及生物医药技术领域，特别涉及下调TRIM56基因表达的siRNA及其应用。

【背景技术】

食管癌(esophageal carcinoma)又叫食道癌，是临床上最常见的消化道恶性肿瘤疾病之一。是发生在食管上皮组织的恶性肿瘤，占所有恶性肿瘤的2％。全世界每年约有30万人死于食管癌，其分布呈现地域性特征，我国是世界上食管癌高发地区之一，食管癌的发生原因与亚硝胺慢性刺激、炎症与创伤以及遗传因素等有关。典型的症状为进行性吞咽困难，先是难咽下干的食物，继而是半流质食物最后水和唾液也不能咽下。

目前，临床上的治疗方法有手术治疗、放疗、化疗、中医抗瘤治疗等治疗手段，来自世界卫生组织国际癌症研究机构的报告显示，食管癌发病率位于世界恶性肿瘤排行榜的第八位，其死亡率位于第六位。中国食管癌的新发病例和死亡率均位居世界第一位。因此，研究食管癌治疗的相关药物是我们目前肿瘤研究中亟需解决的技术问题。

自噬(autophagy)是细胞维持自身生理稳态的一种机制，是细胞中不被使用的组分和受损细胞器被降解与再利用的一种基本过程。细胞自噬活性异常或失控，会导致人体免疫、病原微生物感染、炎症、肿瘤、心血管病、神经退行性疾病等的发生，而自噬活性调节剂(激活或诱导剂，以及抑制剂)有望成为治疗肿瘤、病原微生物感染、免疫性疾病、Ⅱ型糖尿病和神经退行性疾病(例如帕金森症)等的药物；促进癌细胞自噬能有效的起到对癌症进行治疗的作用。

然而，细胞自噬是一个多阶段过程，涉及数十种自噬相关蛋白(ATG)的参与。在细胞启动自噬机制时，自噬体和自噬溶酶体的形成均是非常重要的环节。在研究细胞自噬过程中通常将LC3B-II作为自噬体形成的标志蛋白，LC3B-II是检测细胞自噬活性增高或降低的重要指标。p62作为自噬底物的受体，其水平变化再结合LC3B-II水平变化，可以作为自噬流是否正常的判断标准；通常LC3B-II水平升高、p62水平降低则说明自噬过程增强，反之则说明自噬过程降低；而通过研究癌细胞自噬而得出治疗癌症的药物是目前基因药物研究的新型途径。

【发明内容】

鉴于上述内容，有必要针对癌细胞的自噬功能研究与癌细胞自噬相关的基因，并设计出可干扰其下调表达的siRNA，实现对癌细胞自噬功能的调控，研发相应的肿瘤治疗基因药物。

为达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：

下调TRIM56基因表达的siRNA，所述siRNA的核苷酸序列为序列表SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和/或SEQ ID NO.3中的任意一个。

进一步的，所述TRIM56基因与癌细胞自噬呈负相关。

本发明还包括一种下调TRIM56基因表达的siRNA在促进癌细胞自噬、凋亡中的应用。

本发明还包括一种下调TRIM56基因表达的siRNA促进癌细胞自噬、凋亡中的方法，所述方法为，在癌细胞中转染所述siRNA，下调TRIM56基因表达，实现自噬信号通路相关基因LC3BII的上调表达、p62基因下调表达，促进癌细胞自噬。

进一步的，所述癌细胞为食管癌细胞。

本发明还包括一种下调TRIM56基因表达的siRNA在制备促进癌细胞自噬、凋亡药物中的应用。